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インスリン
http://www.madehow.com/Volume-7/Insulin.html
insulinは、preporinsulinから酵素による分解を受けてproinsulinとなり、更にある酵素により22個のアミノ酸(A鎖)と30個のアミノ酸(B鎖)に分解され、2本鎖のinsulin (5,807Da)となり完成する。
遺伝子組換えによる製造において、製造メーカーにもよるが、以前は、proinsulinを遺伝子組み換えで製造し、別途製造した酵素によりproinsulinを切断してinsulinにする方法が使われていたようで、最近は、A鎖とB鎖を別々に組換え大腸菌で製造し、それぞれを混ぜてco-refoldingすることでfoldしたinsulinを得ているものもある。この条件の詳細についても製造メーカーの技術の見せ所であり、バリエーションが存在しているものと考えられる。例えば、A鎖とB鎖を別々に製造する面倒なことはせず、proinsulinを発現させた後、酵素処理によりA鎖とB鎖に切断し、co-refolingする方法も可能である。このあたりの製造戦略は、競合他社への参入障壁の構築やコスト低減化に対して、各メーカーの腕の見せ所だ。
その他、酵母による分泌系・培養→精製・活性化の手順も使い得るが、酵母の場合、糖鎖付加の問題が厄介なので、シンプルに大腸菌で生産するのが戦略的には間違いない。
編集履歴 2020/02/14 Mr.HARIKIRI
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E.coli
insulin
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