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製造方法の概要
- 大腸菌に目的蛋白質の遺伝子を導入
- 大腸菌の培養
- 刺激剤(IPTG)添加
- 低温培養
- 大腸菌の最大増殖(蛋白質は大腸菌内に蓄積)
- 蓄積した蛋白質は、立体構造が異常(Inclusion body)
- Inclusion bodyは不溶性
- 蛋白変性剤(塩酸グアニジン、尿素)により可溶化処理
- ランダムなSS結合を切断するために還元剤の添加
- 最大希釈により、添加剤の濃度を薄める
- 立体構造が再構成される不溶性から可溶性になる
- 緩衝液の置換処理
- 各種レジンによるクロマト精製
- 緩衝液の置換処理と濃度調整
- 原薬の分注
以上
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用語の解説、関連タグ付き投稿の抽出
culture
DTT
E.coli
expression
refolding
ウレア
培養
塩酸グアニジン
大腸菌
尿素
発現
精製
蛋白変性剤
還元剤
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