[rAAV] rAAVの従来からの精製方法 (PEG沈殿、超遠心), 2010 – ID2417 [2019/09/26]
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rAAV vectorの精製方法
Standard purification Optimized purification Transfection Transfection ︎ ︎
Centrifugation (Cell Pellet by 2,500g x 10min)
Same as left ︎ ︎Freeze-thaw Lysis (50mM Tris-HCl, 150mM NaCl, 2mM MgCl2, pH8.0) Same as left ︎ ︎cfg (2,500g x 10min) Same sa left ︎ ︎cfg-sup cfg-sup + culture supernatant ︎ ︎ ︎8% PEG, 0,5M NaCl by adding 40% PEG 8000, 2.5M NaCl, 2h on ice ︎ ︎ ︎cfg (2,500g x 30min) ︎ ︎ ︎cfg-ppt ︎ ︎ ︎
Resuspend
(50mM Tris-HCl, 150mM NaCl, 2mM MgCl2, pH8.0)
︎ ︎DNase Treatment (100U/mL, 1h, 37’c) Same as left ︎ ︎Ultracentrifugation (104,000g x 24h, 20’c) Same as left ︎ ︎Dialysis vs PBS (overnight) Same as left ︎ ︎Ultracentrifugation (182,000g x 24h, 20’c) Same as left
by Google Ads ID8603 精製手順 スポンサーリンク
by Rakuten ID:15895 Culture -> Cell -> Lysate -> Clarification -> Polyethylene Glycol (PEG) 8000 -> Ultracentrifugation
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注) UltracentrifugationをGradientと業界では読んでいる
High AAV vector purity results in serotype- and tissue-independent enhancement of transduction efficiency
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用語の解説、関連タグ付き投稿の抽出
PEG
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