[Vc] mRNAワクチンとは – Sanofi, Modernaなどが開発を進めている – ID15091 [2020/05/23]

Post Views: 281

mRNAワクチンとは

mRNAワクチンは、核酸医薬であり、核酸のモダリティに分類される。モダリティは、手段を意味しているので、以下のようなものが考えられます。

低分子合成品
タンパク質
核酸
ウイルス (AAV, Lentivirus, Adenovirus)ベクター

mRNAワクチンの優位性

mRNAの優位性について、COVID-19ワクチンとしてTranslate Bio社とmRNAを使って共同開発しているSanofi社のサイトから引用 source

核への侵入を必要とせずにタンパク質生産を開始できる
- DNAワクチンの場合は、核に入って、mRNAに転写させる必要がありますが、mRNAは、細胞質内でRibosomeによってタンパク質への翻訳が可能です
迅速な開発が可能
- タンパク質ベースやその他モダリティよりは、IT技術を駆使できれば迅速な開発は可能と思われます
非ウイルスを使用した低コストの製造と安全な投与
- 従来の生ワクチンや弱毒ワクチンなどと比較して、全くの無生物であること、それらに比べれば製造ステップは少なくてすみます

以下に、mRNAについて文献の内容から概説¹⁾します。

mRNAワクチンは、体内に直接投与する。mRNAはタンパク質をコードする核酸であり、細胞質内に入り込むことができれば、細胞の機能を利用して、コードしたタンパク質が作られる。しかし、RNAは非常に分解されやすいため、医薬品化を達成した品目はない。DNAでは、染色体への相同組換の危険性を伴うが、mRNAではその危険性は全くない。

歴史的経緯

核酸医薬としての最初の報告は、1990年のScience論文です。動物の骨格筋に投与した実験例は2つ実施されました。

プラスミドDNS (pDNA)
mRNA

当初、適切な遺伝子導入試薬を使えば、培養細胞へのpDNAおよびmRNAを細胞に導入(in vitro)することができ、その結果、タンパク質を作らせることができた。しかし、動物の骨格筋への導入(in vivo)では、mRNAでは、タンパク質を作らせることができませんでした。その原因は、mRNAが生体内では、非常に不安定であるためでした。

最近のmRNAに関する研究・開発の成果は、アメリカ、ドイツが中心のようです。日本も頑張って欲しいと思います。

mRNAを医薬にするためには

ARCA法　(anti-reverse cap analogues)の開発*1)
コドン最適化
- 世界は、ITを駆使している分野です。ITが弱い日本で勝機があるのか疑問です。
免疫原性の制御 (メチル化核酸、シュードウリジン、などは、非開示のものも多い)

*1) DNA鋳型としてmRNAが作られますが、次ステップのmRNAからタンパク質をつくるには、mRNA5’末端にcap構造が必要であるため、mRNAにcapアナログを付加しなければ、医薬品にはなりません。しかし、cap構造の人工的な付加は、効率が低く50%程度でした。更に詳しくは、別文献を参照²⁾のこと。次章で述べていますが、これまでの研究では、Capの不要化も検討されているようです。

CleanCap Technology

mRNAへのキャッヒング技術の1つ。自然免疫応答の回避にはキャッピングが必要です。ARCA法では、Cap 0構造であるためパターン認識受容体のRIG-Iに作用してしまう。一方、TriLink BIOTECHNOLGIES社の「CleanCap」では、Cap 1構造が付加できるためRIG-Iに作用せず、飜訳効率が高い
翻訳効率を高める新たなキャッピング技術TriLink 社 CleanCap Technology – nacalai tesque -より

編集履歴
2020/05/03 はりきり(Mr)
2020/05/15 追記 (moderna社が先行するmRNAワクチン)
2020/05/23 追記 (CleanCap法)
2020/09/29 追記 (モダリティ)
2020/10/22 追記 (mRNAワクチンの優位性 ~ Sanofiサイトより引用)

mRNA医薬の構造

医薬品に仕上げるために行われた、重要な研究項目について、以下に示されています。図には、mRNA構造が示されています。翻訳領域であるORF³⁾と比較して、非翻訳領域である5’UTR, 3’UTRの配列⁴⁾の改変は、比較的自由度があります。

1. 5’ Cap

Capの不要化
5’Capの一般的な機能^wiki
- 核外輸送
- 5’-3’エキゾタクレアーゼ抵抗性と分解抵抗性
- 翻訳促進
- イントロンのスプライシング促進

2. 5’ UTR/3’ UTR

mRNA輸送・翻訳など

3. DRF

翻訳効率
分解耐性

4. Poly A

mRNA安定化

5. mRNA全体

免疫原性の低減化

図1. 治療用mRNAの構造

参考文献¹⁾, p.454参照。

mRNA医薬の方向性

mRNA医薬は、広義の遺伝子治療の範疇であるが、ホスト細胞のゲノムへの取り込みがないことは、大きなメリットである。そのため、比較的一般的な治療にも適用が考えられる。

ワクチン
- Moderna (US)
- BioNTech (ドイツ)
- CureVac (ドイツ)
- GSK
非遺伝性の疾患全般
加齢変性疾患
外傷

課題

mRNAワクチン
- 皮下投与であるため高性能なDDSは必要ない
標的細胞へのDDS
- 脂質ナノ粒子 (LNP, 非開示): 炎症反応の惹起がある。
- ポリマー粒子: 組織浸透性が優れている
免疫反応の低減化

ワクチン

一般的に、DDS併用でない場合、免疫賦活化作用が十分ではない。部分的にmRNAの二本鎖構造にして、抗原提示能と免疫賦活作用を併せ持つmRNAの開発も行われている。

mRNAワクチンで先人を切っているのは、米国のmoderna社です。詳しくは、以下の記事をご覧ください。

がんワクチン

液性免疫と細胞性免疫に適用可能
2017年、BioNTechのメラノーマワクチン(new-antigen mRNAワクチン)
PD-(L)1阻害剤 (免疫チェックポイント阻害剤)との併用。BioNTechは、Genentechと共同で臨床試験実施。CureVacはEli Lilly, ModernaはMerckと併用の臨床試験を実施。

一般治療

成長因子 (overdoseが抑制できる)
- VEGF mRNA (心虚血疾患、二型糖尿病皮下投与、アストラゼネカ)
- 組織再生(徐放): 軟骨、椎間板
シグナル
- 非分裂成熟細胞(脳神経系など)
酵素
- 遺伝性稀少疾患(酵素補充)
膜タンパク質

特許

天然の核酸分子の配列では、特許は取れない。

以上

参考文献

1) mRNA 医薬開発の世界的動向, 医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス

mRNA 医薬開発の世界的動向, 医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス，PMDRS，50(5)，242 ~ 249(2019)
http://nats.kenkyuukai.jp/images/sys/information/20190717095649-6ABC2FA50410294C82EBEF7D74463510333BCF1FB717B3F864612BCB0CA9F6B2.pdf

2) メッセンジャー RNA 医薬を実現する DDS 開発と疾患治療への応用

メッセンジャー RNA 医薬を実現する DDS 開発と疾患治療への応用、Drug Delivery System 31―4, 2016
https://www.jstage.jst.go.jp/article/dds/31/4/31_343/_pdf

3) ゲノム解析とは

ゲノム解析とは – nite – より
ＯＲＦは、開始コドンと呼ばれる３塩基から始まり、終止コドンと呼ばれる３塩基で終わります。また、アミノ酸に対応するコドンも解読されており、ＯＲＦの推定はコンピュータを用いて行います。
https://www.nite.go.jp/nbrc/genome/description/analysis2.html

4) 非翻訳領域

非翻訳領域 – wikipedia – より
https://ja.wikipedia.org/wiki/非翻訳領域

5) mRNAサーベイランスとは

mRNAサーベイランスとは、大野研究室　分子細胞生物学　Cell Signaling – より
http://www-user.yokohama-cu.ac.jp/~ohnos/research/mRNA.html