カテゴリー
BIOLOGICS culture education

[Bio-Culture] CHO細胞の培養における制御パラメータ、添加物及び装置・設備の事例 – ID6721[2020/09/08]

[Bio-Culture] CHO細胞の培養における制御パラメータ、添加物及び装置・設備の事例 – ID6721[2020/09/08]

細胞培養とは

細胞を無菌・人工的に育てること

制御パラメータ

  • 培養装置
    • 細胞バンクの保管容器
    • フラスコ (ポリ材質)
    • WAVE培養装置
    • iCellis (付着細胞用)
    • Bioreactor (浮遊細胞用)
  • シングルユースバッグ(ポリ材質)
    • Extractable and leachables (E&L/溶出物/浸出物)の問題を抱えている
    • ThermoFisher SciencesのSingle Use Bagす少ないらしい
    • E&L試験の概要 source: 一般社団法人化学物質評価研究機構
    • リスク評価→溶出試験(ワーストケース試験)→毒性試験→浸出試験(実環境の製品)
  • ステンレスタンク
  • 微量混入
    • タングステン(W)
  • 細胞周期
    • ダブリングタイム
      • 安定的に目的タンパク質を生産できる細胞の世代数は、細胞株の構築時に確認されている
      • プロダクション培養のスケールまで拡大培養していく過程で、その世代数は進む
      • プロダクション培養では、一般的に15日以内で終了することになるが、確認された世代数以内で完了しなければならない
    • 安定期
    • 分裂期
  • 温度
    • 基本的に37℃付近で制御する。酵母などでは動物細胞と違い発熱量が多いため基本的に冷却するが、動物細胞の場合、加温することが基本である。
    • 200L SUBでは、Jacket(7L)にLauda製の温度制御装置は、2.25kW加熱、1.25kW冷却を備える5)
  • pH
    • 新陳代謝によるpHの変動を制御。乳酸が蓄積されてくるとpHは下がる
    • 炭酸ナトリウム添加、CO2のスパージ
    • センサープローブ (Finess 5))
  • DO
    • Air, O2のスパージ
    • 30%~90% 5) : 一般的に40%を設定
    • DOプローブ (Finess 5))
  • 通気量
    • BIoreactorのトップからの吹付け、スパージング
    • 200L SUBのO2, Air, N2,では、20 standard liters/minute (SLPM)、CO2では、5 SLPM5)
  • 攪拌速度
    • 細胞の均一化、継続的・随時供給する栄養素の供給の均一化
    • 200L SUBでは、95~140rmp5)
  • 培地
    • 基礎培地 & フィード培地
      • アミノ酸
      • 栄養素
  • 酸素分圧
    • 細胞の呼吸
  • 二酸化炭素分圧(pCO2)
    • 二酸化炭素の培地中溶存量によりpH制御。pCOが低下するとpHが上がる。
    • 細胞培養により代謝産物として作られた乳酸は、pHを下げる
    • 下がったpHを上げるには、CO2を吹き込んでpCOを高める
  • エネルギー源: グルコース
    • 細胞が分裂したり目的蛋白質を生産するエネルギー源
  • ミネラル
    • 細胞が正しく活動するため
    • 亜鉛
    • マンガン
  • 無機塩
    • そのためpH制御のために炭酸ナトリウムの随時添加
  • 脂質
    • 細胞は細胞膜が一番外側にあり、その構成ようしは、蛋白質と脂質の混合構成となっていおり、細胞分裂に必要
  • 成長因子
    • 直接的な細胞増殖のために添加される
  • Antiform, Pluronic F68 5)
  • 代謝産物(中間体)の役割
    • ある代謝サイクルにおける律速の充足効果は研究が続けられている
    • α-ketogultalate (AKG) の添加効果(最近のアンチエイジングのマウスへの摂食研究では、健康寿命や寿命自体が伸びる)

参考文献

1)

1から分かる細胞培養における培養環境

https://www.thermofisher.com/blog/learning-at-the-bench/cell-culture-environment/
2)

Chinese Hamster Ovary(CHO)細胞を用いた高品質 な抗体医薬の高生産培養システムの開発

https://tsukuba.repo.nii.ac.jp/index.php?action=pages_view_main&active_action=repository_action_common_download&item_id=36952&item_no=1&attribute_id=17&file_no=1&page_id=13&block_id=83
3)

公開特許公報(A)_細胞培養制御方法、細胞培養制御装置及びこれを備える細胞培養装置

https://biosciencedbc.jp/dbsearch/Patent/page/ipdl2_JPP_an_2011229215.html
4)

CHO プロトコール System200

https://www.gelifesciences.co.jp/tech_support/manual/pdf/wave_03_16.pdf
5)

The Unican Concept: Engineering Dual Capability into Single-Use Vessels

https://bioprocessintl.com/upstream-processing/upstream-single-use-technologies/unican-concept-engineering-dual-capability-single-use-vessels/
気になる成分 – AKG; αケトグルタル酸 – アンチエイジング効果のあるTCA回路代謝物 – ID22185 [2020/11/07]

AKG AKG; Alpha keto glutarate; αケトグルタル酸 AKGは、グルタミン酸の前駆体であり、トリカルボン酸サイクルの重要な中間体である。アンチエイジング効果についての論文がよく出されています。 […]

編集履歴
2020/01/11 HARIKIRI(MR)
2020/09/08 追記(付着及び浮遊細胞用装置、AKG代謝)

用語の解説、関連タグ付き投稿の抽出

cho

[Bio-Culture] CHO細胞の培養における制御パラメータ、添加物及び装置・設備の事例 – ID6721[2020/09/08]
[Bio-Edu] 高分子蛋白質の組換え宿主細胞として大腸菌、酵母に勝るCHO細胞 – ID6629
[Bio-Material] 一過性発現 – 品質・生産性とも安定発現株に迫る – Gibco ExpiCHO Expression System (ThermoFisher) – ID5031
[用語] CHO; Chinese Hamster Ovary – ID18725

culture

[rAAV-Design] – 治療用AAV Vectorの設計 – 考慮事項 – ID12947 [2020/06/24]
[rAAV-Production] – 治療用AAV Vector製造 – 考慮事項 – ID12844-UM [2020/10/14]
[Bio-Equip] WAVE 25 Rocker – GE – ID11509
[Bio-Process] 拡大培養/Subculture – ID9342
[Bio-Process] 細胞融解から拡大培養の開始 – フラスコ培養/Inoculum – ID9636
[Bio-Culture] CHO細胞の培養における制御パラメータ、添加物及び装置・設備の事例 – ID6721[2020/09/08]

パラメータ

[Bio-Culture] CHO細胞の培養における制御パラメータ、添加物及び装置・設備の事例 – ID6721[2020/09/08]

Update ID21920

AAV, BIOLOGICS, company, COMPANY-FAVOR, creative bio
気になる企業 – Creative Biolabs Inc. はcGMP製造もできるCRO – ID2413 [2020/05/21]

目次1 Creative BioLabs2 Comprehensive service portfolio including antibody3 cGMP manufacturing4 Development5 Pro […]

arcturus, BIOLOGICS, company, COMPANY-FAVOR, vaccine
気になる企業 – Arcturus Therapeutics – mRNAによる希少疾患とワクチン開発に特化 – ID15742 [2020/05/16]

目次1 Arcturus Therapeutics2 Duke-NUS Arcturus Therapeutics 2013年に設立、カリフォルニア州サンディエゴ Arcturus Therapeutics Holdin […]

ear, HEALTH
[健康-偉人] 難聴から「ベートーべン; Beethoben」を学ぶ – [2020/11/23] ID24944

目次1 はじめに2 Beethoben3 高音が聞こえなくなる機序 はじめに 音楽の事業で最初に覚えた偉人の名前は、ベートーベンでした。小学生や中学生の頃、音楽教室には、音楽家の肖像画が壁に飾れていたことを思い出します。 […]

Gear
[健康] 突発性難聴と付き合うためのギア-ソニーのお洒落な集音器 – ID1288

ソニーのSMR-10 ソニーのSMR-10という耳掛け集音器を、ヨドバシ通信で見かけました。昨年末に突発性難聴になってから、月単位で改善するとタカをくくっていたのですが、全く改善されず今日に至っています。 片耳の難聴です […]

ear, HEALTH
[健康] 突発性難聴の診断と治療 (KOMPAS) – ID2719

目次1 難聴の障害箇所の分類2 発症機序3 診断4 治療5 文献 難聴の障害箇所の分類 外耳中耳: 伝音難聴 -> 突発性難聴ではない 中耳: 感音性難聴 -> 突発性難聴の可能性あり 発症機序 2つの有力な […]

anime, LIFE
[アニメ] 暗殺教室 (2015,2016) – 中学校教師のアナロジー – 忘れかけていた志(こころざし)が蘇(よみがえ)る感覚 – ID24932 [2020/11/22]

目次1 暗殺教室2 暗殺教室シーズン13 暗殺教室シーズン2 暗殺教室 2015年にシーズン1(全22話)、2016年にファイナル・シーズン(全25話)、素晴らしかった。感動した。忘れかけてた名言も、自分の中で蘇った。 […]

更新された投稿の最新順

最新記事(Biologics, ID:14673)

BIOLOGICS, CMO, gene-therapy
気になる企業 ベクタービルダー /デザイン/受託/開発/GMP製造 [2020/11/21] ID24901

目次1 VectorBuilder1.1 サイトでできること1.2 ベクターデザインできる種類2 GMP施設 VectorBuilder ベクタービルダー・ジャパンのサイトより。 2015 foundingの受託会社です […]

BIOLOGICS
[Bio-Develop] PC原薬とcGMP原薬を共用するスケジュールは大前提がありバイオロジクス開発では合理的でない – [2020/11/14] UM – ID24792

目次1 低分子開発と同じと考えていないか?2 結論 低分子開発と同じと考えていないか? バイオロジクスに限って言えば、Pre-clinical用の原薬(PC原薬)とClinical用の原薬(cGMP原薬)を供用することは […]

BIOLOGICS, equipment-chromato, vaccine
[Bio-Equip] Cytiva – Plasmidselect Xtra [2020/11/14] ID24783

PlasmidSelect Xtra Super coilになっているplasmid DNAを精製するクロマト担体。 Plasmidselect Xtra – Cytiva – 製品情報 http […]

AAV, BIOLOGICS, CMO, gene-therapy
気になる企業 – Molecular Medicine ;MolMed – ID12516 [2020/11/09]

目次1 MolMed1.1 サービス2 AGCが買収 MolMed イタリア ウイルス・ベクターを用いた遺伝子治療薬製造のCDMO サービス MolMed独自のテクノロジーを持っている。 MolMedは、ベクター製造用の […]

BIOLOGICS, company, vaccine
気になる企業 – Bayer – ID24577

Bayer ドイツのバイエルも、米Asklepios BioPharmaceutical社を買収することで、遺伝子治療の分野に本格的に参入するようです。もともとバイエル社は、遺伝子細胞治療薬(CGT)の開発を推進していま […]

Page: 1 2 66

最新記事(Education)

AAV, BIOLOGICS, education
[Bio-Edu] ウイルスの等電点(pI) – 組換えAAVでは,empty/fullの違いでpIは異なる – ID24561 [2020/11/04]

目次1 ウイルスの等電点(pI or IEP)2 ウイルスの等電点の検証結果の詳細3 AAV1~AAV10のpI計算4 AAV8, AAV9のpI5 AAV tree ウイルスの等電点(pI or IEP) 以下,文献に […]

BIOLOGICS, education
[Bio-Edu] DNAとRNAの違い – レジメ – ID24191 [2020/10/11]※

目次1 DNAとRNAの違い1.1 3つの部品単位 DNAとRNAの違い DNAはRNAの設計図になります。 DNAを設計図にして、RNAポリメラーゼという酵素により、RNAが作られる 3つの部品単位 「糖」と「核酸塩基 […]

BIOLOGICS, education
[Bio-Education] 医薬品の開発スケジュール

医薬品の開発スケジュール バイオロジクスの開発スケジュールは、以下のようにモダリティの開発を進めつつ、臨床試験を実施し、その結果をもとにさらに臨床試験を実施し、最終的に製造許可を受けます。 その後、製品についてのモニタリ […]

BIOLOGICS, education, reagent
[Bio-Edu] 核酸の抽出 – QIAGEN製品 – ID21335 [2020/08/17]

核酸抽出に使用されるキット 検体によって使い分けされます。 Source: DNAチップ研究所 ■ QIAamp DNA Mini Kit (通常組織用)https://www.qiagen.com/jp/shop/sa […]

BIOLOGICS, education, HEALTH
[Virus-Edu] 新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)の感染機序 – ID20003 [2020/07/27]※

目次1 新型コロナウイルスの感染機序1.1 1a Fusionでの感染1.2 1b 貪食での感染 新型コロナウイルスの感染機序 新型コロナウイルス (SARS-CoV-2) 感染のある過程で、以下に説明する薬剤の臨床試験 […]

BIOLOGICS, education
[Bio-Edu] mAbの不安定性について – ID17993 [2020/07/31]

目次1 mAbの不安定性1.1 IgG抗体の構造1.2 抗体の種類1.2.1 アイソタイプ1.2.2 サブタイプ1.2.3 翻訳後修飾の違い2 不安定化の局面2.1 原因2.2 結果3 不安定化のメカニズム mAbの不安 […]

Page: 1 2 13

その他記事(ALL-RANDOM, ID:16786)

BIOLOGICS, equipment-storage, production
[Bio-Process] 原薬の超低温保管 ID9640

バイオロジクス精製原薬を長期保存するまてには、除菌ろ過フィルターでろ過、ガス透過性が低いHDPE製のプラスチックボトルに小分け分注(aliquot)し、長期保存も考慮して超低温冷凍庫にて凍結保管する。 目次1 ロジスティ […]

BIOLOGICS
[Bio-Edu] 免疫グロブリンG; IgG – ID8697

免疫グロブリンには、複数のタイプが存在する。微生物やウイルス感染の初期2周後に生体内では、IgMという免疫ブロプリンが産生され、初期免疫が開始される。IgMは、IgGの基本構造を1単位とすると5単位で構成されている。分子 […]

HEALTH, KNOWLEDGE
[健康] 新型コロナウイルス(Sars-Cov-2)、MARS/SARSとの違い – 感染力 – ID10959 [2020/10/11]

目次1 風邪のウイルス、コロナウイルス2 動物からヒトへ感染するコロナウイルス3 物性など3.1 安定性(感染力)まとめ3.2 消毒3.3 コロナウイルスの物性・特徴4 新型コロナウイルスとSARS/MERSとの比較5 […]

key-word
[用語] パーキンソン病 – ID24572

全身性エリテマトーデス

BIOLOGICS, production
[Data Link] Continuous Manufacturing in Biotech Processes – Challenges for Implementation – ID9077

Continuous Manufacturing in Biotech Processes – Challenges for Implementation https://ispe.org/pharmaceu […]

BIOLOGICS, education, purification
[Bio-Edu] 組換え大腸菌で造らせたタンパク質のリフォールディングおよび、その後の精製手順 – ID18567 [2020/08/19]※

目次1 はじめに2 Refoldingとは3 組換え大腸菌の産生タンパク質3.1 Inclusion bodyの回収3.2 可溶化とrefolding3.3 バッファ組成の置換3.3.1 Refoldingの評価3.3. […]

Page: 1 2 146

- 以下のツールに敬意を示します -
Support to AMP (Accelerated Mobile Pages) by official AMP plugin for WordPress, and compatible powered by
Post viewing : Flex Posts - Widget and Gutenberg Block