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[Bio-Process] バイオロジクスにおける本培養の概要/Production – [2021/10/30]

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Production Culture

抗体の場合、一般に2週間の本培養が実施される。ウイルスベクターの場合、培養スケールに応じた拡大培養期間と、その後の3日間程度のプラスミドトランスフェクションが実施される

重要なことは、生産量が最大になるように培養条件が設定されていることである。次に、培養の終了と判断できる条件も設定されており、産生されたプロダクトが分解などの劣化が無いように設定される。

抗体医薬の場合

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  • 抗体産生細胞のプロダクション培養
  • 殆どの抗体の場合、CHO細胞が使用される
  • 仕込み培地
  • フィード培地
  • エアー、酸素、窒素、二酸化炭素
  • 微小金属 (Trace Metal)
  • アミノ酸
  • グロースホルモン
  • 温度
  • pH
  • 攪拌
  • 消泡剤
  • Plutonic F-68 (細胞保護剤)
  • プロダクション培養(本培養)の期間は最長でも15日
  • 抗体産生量の測定(Protein Aカラム-HPLC)

rAAVの場合

  • 原材料としてのプラスミド製造 (宿主細胞: E.coli)
  • rAAV製造 (宿主細胞: 昆虫細胞、HEK細胞、CHO細胞などの培養
  • 仕込み培地
  • フィード培地
  • 酸素
  • 温度 (37℃)
  • pH
  • 攪拌
  • 消泡剤
  • プラスミドのトランスフェクション(24~72時間)
    • ポリエチレンイミン
    • カルシウム
  • rAAV産生量の測定 (better : droplet digital PCR(ddPCR) > qPCR

カルタヘナ対応 (当局対応)

微生物 (E.coliなど)を使用する場合、カルタヘナ議定書に調印している国では(日本など)は、カルタヘナ法に関わる当局への申請が必要となる。

二種申請

申請には、以下の2つのタイミングがある

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  • Plasmid産生株E.coliバンクの製造開始前
  • PlasmidのGMP製造開始前

Xcellarex, data sheet –

https://www.gelifesciences.co.jp/catalog/pdf/xdr-datasheet.pdf

編集履歴

2020/02/01, Mr.HARIKIRI
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