[Bio-Edu] 遺伝子組換え大腸菌からタンパク質を精製する製造フロー概略 – ID6624 [2020/01/09]

製造方法の概要

1. 大腸菌に目的蛋白質の遺伝子を導入
2. 大腸菌の培養
3. 刺激剤(IPTG)添加
4. 低温培養
5. 大腸菌の最大増殖(蛋白質は大腸菌内に蓄積)
6. 蓄積した蛋白質は、立体構造が異常(Inclusion body)
7. Inclusion bodyは不溶性
8. 蛋白変性剤(塩酸グアニジン、尿素)により可溶化処理
9. ランダムなSS結合を切断するために還元剤の添加
10. 最大希釈により、添加剤の濃度を薄める
11. 立体構造が再構成される不溶性から可溶性になる
12. 緩衝液の置換処理
13. 各種レジンによるクロマト精製
14. 緩衝液の置換処理と濃度調整
15. 原薬の分注

以上

関連記事:

[Bio-Edu] 今昔 – 天然型から遺伝子組換え型への移行圧力 – ID6626 [2020/01/09] [Bio-Process] 拡大培養/Subculture – ID9342 [2020/02/01] [Bio-Edu] インスリン: Insulinの製法 – ID9405 [Bio-Process] 細胞の凍結融解から拡大培養の開始 – フラスコ培養/Inoculum – △ID9636 [2020/02/01] [Bio-Equip] WAVE 25 Rocker – GE – ID11509 [2020/03/06] [Bio-Edu] CHO細胞培養プロセス – スケールアップ – 温度シフトの検討は欠かせない [2020/10/30] [Bio-Edu] 組換え大腸菌で造らせたタンパク質のリフォールディングおよび、その後の精製手順 [2020/08/19] [Bio-Culture] 大腸菌; E.coliの増殖率は細胞長の増大に関わる [2021/02/27] [Bio-Culture] CHO細胞の培養における制御パラメータ、添加物及び装置・設備の事例 – ID6721[2020/09/08] [Bio-Equip] Imaged cIEF and CE-SDS – proteinsimple – ID11524 [2020/03/06]