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  • [用語] DNA; Deoxyribonucleic acid – Histoneを介した染色体の折り畳みまでを順を追って解説  [2020/09/23]

    [用語] DNA; Deoxyribonucleic acid – Histoneを介した染色体の折り畳みまでを順を追って解説 [2020/09/23]

    DNA

    DNA; Deoxyribonucleic acid; デオキシリボ核酸。DNAは塩基の相補的結合によって2本が結合し二重螺旋 (DNA double helix)を形成します。人の23本の染色体に収められているDNAの長さは、総長30億塩基対です。卵子と精子を除く細胞は、2倍体なので、染色体は、46本(うち性染色体が2つ、DNAの総長は60億塩基対になります。

    機能の有無で分けた場合、DNAには、イントロンとエクソンのそれぞれの領域が存在する。

    昔々のバイオロジクス生産細胞株の品質管理

    もう40年も前のことですが、IFNをリンパ芽球で生産していた頃、細胞の染色体数を先輩がカウントしていたことを思い出します。当時は、それくらいしか検査する項目が無かったからです。

    1) DNAから染色体までのパッケージングについて、わかり易い図があります。クロマチン構造のDNAの巻き数は1.65回とありましたが、また、以下の2)の文献では、1.75回とありました。どちらが正しいのかは不明です。

    DNA Packaging: Nucleosomes and Chromatin – Scitable by nature EDUCATION

    https://www.nature.com/scitable/topicpage/dna-packaging-nucleosomes-and-chromatin-310/

    2)DNA-Histone結合体の分かり易い図があります。

    クロマチン構造 – 分子遺伝学研究所 広島大学 –

    http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/chromatin/chromatin1.html

    塩基対の幅は、2nmです。塩基対の長さは、約0.34nmです。60億を掛ける (0.34nm x 6e9 = 約2m)と、2倍体の細胞には、2mのDNAを含んていることになります。

    人体には、約50兆個の細胞があると推定されるているので、人には、100兆メートルのDNAが含まれている計算です。

    1. Nucleosomeの形成

    DNAは、8 x Histone protein (2 x (H2A-H2B二量体) + (2 x H3, 2 x H4, オセロのチップのような平たな円柱構造の円周にDNAが巻きつく)の円周に1.65回巻かれます。

    この1つのDNA-タンパク質結合体の単位を「Nucleosome」といい、DNAの長さ分だけ形成されます。この紐状のものを「Chromatin」と言います。実は、Chromatin線維は、細胞周期の間期に観察可能です source

    すなわち、

    • 二重螺旋の紐状のDNAは、以下の流れで最初の太い紐になります
    • 8 x Histone (Histone Octamer) および1 x H1 histone proteinの球体に、糸巻きのように巻かれて、多数の基本単位であるDNA-Histone 結合体であるNucleosomeを作ります、
    • 一つのNucleosomeには、146塩基対のDNAが含まれます
    • DNA-Histon結合体の直径は11nmです

    1: Histone H1° (NEB #M2501) 1 μg; 2: Histone H2A (NEB #M2502) 1 μg; 3: Histone H2B (NEB #M2505) 1 μg; 4: Histone H3.1 (NEB #M2503) 1 μg; 5: Histone H3.2 (NEB #M2506) 1 μg; 6: Histone H3.3 (NEB #M2507) 1 μg; 7: Histone H4 (NEB #M2504) 1 μg; 8: Histone H2A/H2B Dimer (NEB #M2508) 2 μg; 9: Histone H3.1/H4 Tetramer (NEB #M2509) 2 μg; 10: NEB Protein Ladder (NEB #P7703)

    図 Histoneの分子量 (SDS-PAGE)

    2. Chromatosomeの形成

    • Nucleosomeに1つのHistone 1 (H1) histone proteinが加わり
    • Chromatosomeになります

    2. Chromatinの形成

    • おそらく、H1の追加により、Chromatosomeの12~13個を一周とする構造を形成するための方向性を持つようになると考えられます
    • Chromatosomeが、12~13個を一周として配置されハッキングされた、この全体の構造体線維をChromatinと言います
    • その一週の直径は、30nmです

    3. Chromatinの螺旋・ループ形成

    Chromatinは、「ねじれ」て、更に太い紐状になりパッケージングされます(便宜上、Chromatin螺旋、と称します)。Chromatin螺旋は、更に、ループ状に短縮されます(便宜上、Chromatin螺旋・ループ、と称します)。このループの長さは300nmです。

    すなわち、

    • Chromatinは、螺旋状にねじれて太い紐状に短縮され、
    • さらに、その太い紐状は、ループに折り畳まれれてパッキングされます
    • そのループの長さは300nmです。
    • Chromatin螺旋・ループが完成します

    4. Chromatin螺旋・ループの最後の螺旋形成

    • Chromatin螺旋・ループは、更に螺旋を形成します(便宜上、Chromatin螺旋・ループ・螺旋、と称します)。
    • 螺旋を形成することで、Chromatosome螺旋ループの幅は、コンプレスされて、300nmから250nmに縮小されます。
    • Chromatin螺旋・ループ・螺旋の直径は、700nmです

    5. 最後、染色体への形成

    染色体 (chromosome) は、染色分体; chromatidを形成するために、Chromatin螺旋・ループ・螺旋は、最後の折り畳みが行われます。

    分裂期の染色体は、一対の姉妹染色分体(それぞれを染色分体; chromatidという)からなるためXの形をしています。また、分裂期には、短腕と長腕の間にある「セントメア」に微小管のキネトコアにより姉妹染色分体は、両極に引き寄せられて分裂を完了します。source:wiki

    編集履歴
    2020/09/21 Mr.HARIKIRI
    2020/09/23 追記 (Histone分子量)
  • 今日の英語 – シチュエーションに応じた – 感謝を示す – despite holiday season, [2020/08/22]

    今日の英語 – シチュエーションに応じた – 感謝を示す – despite holiday season, [2020/08/22]

    Despite holiday season,

    Despite holiday season, your continuous support was so much appreciated..
    休みにもかかわらず、継続的な支援について感謝します。
    編集履歴
    2020/08/22 Mr.はりきり
  • [Cafe] 神戸屋ブレッドラブ 豊中店

    [Cafe] 神戸屋ブレッドラブ 豊中店

    神戸屋ブレッドラブ 豊中店

    モーニングセットもボリュームがあり、以前は、週一くらいで車を飛ばして来ていました。最近は、梅田方面に用事がないのでご無沙汰です。

    大阪から新御堂道を車で江坂へ向かい、江坂手前で川を渡ってすぐに側道を降りて直ぐの信号を左折して、道なりに真っ直ぐ進む。江坂テニスセンターを右に見ながらそのまま進み、再度川を渡ると右側に豊中市立高川小学校が見えます。すぐの交差点を左折して真っ直ぐ道なりに進むと、右にEDIONが見えてきます。そのEDIONの四つ角の対角側にニトリと共に「神戸屋ブレッドラブ豊中店」があります。駐車場に入るには、その交差点をそのまま真っ直ぐ進み、左側にあるP入り口から入ります。

    編集情報
    2020/08/02 Mr.はりきり
  • [Kw] 雷が鳴った! – 近さはどれくらい? – ピカ・ドカンと音速から計算する [2020/08/21]

    [Kw] 雷が鳴った! – 近さはどれくらい? – ピカ・ドカンと音速から計算する [2020/08/21]

    雷の落ちた場所は、「ピカ・ドカン」と音速から求める

    雷の光と音「ピカ・ドカン」で、その距離が分かります。光が見えた時が、その雷が落ちた時と同時です。光速は高速だからです。音速は、340m/sです。

    もしも、ピカ・ドカンの時間差が1秒なら、その距離は、自分のいたところから、340mの方角ということになります。

    音速を調べてみると、以下のサイト「ke!san」がありました。温度で音速は、変わるようです。340m/sの音速は、15℃の環境下であって、この季節の30℃では、少し早くなり、349m/sの計算結果となりました。

    サイト名 : ke!san

    https://keisan.casio.jp/exec/system/1231998943
  • [用語] CDA; Clean Dry Air [2020/08/21]

    [用語] CDA; Clean Dry Air [2020/08/21]

    CDA

    CDA; Clean Dry Air : バイオ医薬品の製造ルームに供給するクリーンな空気

    編集履歴
    2020/08/21 Mr.HARIKIRI
  • [WordPress] blogに載せる写真のメタデータは、EWWW Image Optimizerで取り除く [2020/08/20]

    [WordPress] blogに載せる写真のメタデータは、EWWW Image Optimizerで取り除く [2020/08/20]

    EWWW Image Optimizerプラグイン

    WordPressのblogで載せる写真は、そのままのサイズでアップしてはいけません。メタデータはそのまま残っているためです。メタデータのGeotabには、位置情報が記録されています。WordPressのプラグインの内、写真のサイズを小さくしてくれるプラグインを使えば、将来にきっと困るサイトのレスポンス速度も改善するので、単にメタ情報だけを取り除くプラグインよりは合理的です。EWWW Image Optimizer というプラグインは、写真のデータサイズを小さくできるし、メタデータも削除する事ができます。無料版では、小さくできる割合が50%程度ですが、有料版では、10%未満の縮小化も可能です。確か、¥1,000で3,000枚の写真を処理できる許可がもらえます。最初は、これで試してよければ、更に購入すれば良いでしょう。

    運用方法

    無尽蔵に写真をblogに使用するためにアップロードすると、EWWW Image Optimzerで購入した写真数を直ぐに超えてしまいます。サイズ違いもカウントされるので注意が必要です。

    そこで、Mr.Harikiriは以下の方法を考えました。スライドショーにできる写真は、iOSの写真アプリでスライドショーにしてしまうのです。

    そのスライドショーを写真の代替にして、写真は、削除します。削除するとEWWW Image Optimizerの可能な写真数を削減できるはずです。

    編集履歴

    2020/08/20, Mr. Harikri
    2022/08/12, 追記(運用方法: スライドショーにしてしてしまう)

  • 今日の英語 – 誠実な対応への感謝 – really appreciate [2020/08/20]

    今日の英語 – 誠実な対応への感謝 – really appreciate [2020/08/20]

    really appreciate

    I really appreciate your sincere response.
    誠実に対応頂きありがとうございます。
    編集履歴
    2020/08/19 Mr.HARIKIRI
  • 今日の英語 – 機密と限定 – confidential and intended only for  [2020/08/20]

    今日の英語 – 機密と限定 – confidential and intended only for [2020/08/20]

    confidential and intended only for ~

    This page is confidential and intended only for the person (involved) in A company.
    このペーパーは機密情報であり、A社に関係する者のみを対象とする。
    編集履歴
    2020/08/20 Mr.HARIKIRI
  • [Bio-Edu] 無菌医薬品の製造区域の環境モニタリング (レジメ)  [2020/08/20]

    [Bio-Edu] 無菌医薬品の製造区域の環境モニタリング (レジメ) [2020/08/20]

    無菌医薬品製造区域の環境モニタリング

    参考サイト: Beckman courlter

    パーティクルカウンターで浮遊する粒子を測定する。

    製造区域

    • 培養室
    • ハーベスト室
    • 精製室
    • 容器の洗浄・乾燥室
    • バッファ調製室
    • 原料秤量室
    • 滅菌室
    • 充填室(bulk Fill finish)
    • 包装
    • 更衣室

    製造区域のグレード分類

    • グレードA
      • 汚染リスクを高いレベルで防ぐ
      • 局所的な区域
      • 無菌医薬品、容器、栓の無菌性維持
      • 無菌接続
      • 無菌充填
      • 容器閉塞
    • グレードB
      • 比較的高いレベルで防ぐ
      • 多目的な区域
      • 滅菌後の容器や原材料及び中間体の搬入場所
      • グレードAであるアイソレータ、ブローフィルシールの周りの環境はグレードBで良い
    • グレードC, D
      • 滅菌前の作業場所
      • 洗浄室
      • アイソレータの周辺環境として使用される

    粒子数

    許容空中浮遊微粒子数(個/m3)

    非作業時非作業時作業時作業時推奨モニタリング頻度
    グレード0.5 µm以上5.0 µm以上0.5 µm以上5.0 µm以上n/a
    A352020352020作業中
    B3520293520002900作業中
    C3520002900352000029000月一
    D352000029000—-※2 —-※2 月一
    ※1 非作業時の値は、作業終了後、一般に15~20分後に達成されるべき値である。
    ※2 この区域の許容微粒子数は、作業形態により異なる。

    モニタリングポイント

    • 製造区域の空気
    • 設備表面
    • 手袋
    • 作業衣など
    • 考慮事項 : 重要作業箇所、汚染されやすい箇所、製造区域の清浄度を代表する箇所などを考慮

    微粒子測定にあたっての注意点

    • 測定数値は、平均値として評価を行う。過小評価しないこと
    • 校正済みの装置を用いること。装置本体、サンプリングチューブの長さ、直径及び曲がり部分の直径などに注意すること
    • 5.0 μm以上の大サイズ微粒子は、比較的速く落下するので、長いチューブ使用は避ける
    • グレードA区域は、連続モニタリングが推奨される。サンプリング量は1m3当たりに正確に換算できる量であること

    (参考:第十六改正 日本薬局方 第一追補 参考情報)

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    2020/08/20 Mr.HARIKIRI
  • 今日の英語 – 〜のために – In order to 〜/ to 〜 [2020/08/19]

    今日の英語 – 〜のために – In order to 〜/ to 〜 [2020/08/19]

    In order to ~ ; ~のために

    「in order to」は、Forを使っても表現可能です(ただし、目的語は、名詞句)。冗長な言い回しは、おそらく文語的で丁寧な表現です。「in order to」の代わりに「to」を使っても同じ意味になります。不定詞の「to」以下は、当然、動詞句になります。

    In order to support this, I will do it.
    それをサポートするために、私はそれ実施するつもりです。
    For supporting of this, I will do it.
    (forを使っても、意味は同じだと思います。英語は、気負わず使える単語を使っていきながら、言い回しを増やしていけばいいのです)
    in order to
    to
    for
    編集履歴
    2020/08/19 Mr.HARIKIRI