カテゴリー: BIOLOGICS

[rAAV] rAAVベクターの精製方法 – Universal Method (2018) – ID2266 [2019/09/18]
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はじめに
遺伝子治療薬のデリバリー・システムとしてAAV使用が盛んです。今後は、AAVの精製についても抗体医薬と同様に精製方法のプラットフォーム化が進むと予想されます。それを目指して精製関連機材メーカーは、意欲的な製品を発表しているところです。
ここでは、AAVの精製方法について情報を集めてみたいと思います。現状が把握できれば、今後の方向性も自ずと見えてきます。
文献の内容
AAVの血清型に依存しないプットフォーム化された精製方法に関する文献
GE HealthcareのAVB SepharoseとPOROSの CaptureSelect AAV8及びAAV9の比較
トリビア: 欧州で開発された最初の遺伝子治療薬Glybera (AAV1-LDL)
Affinity精製の不利な点は、遺伝子が封入の有無(Empty/Full)にかかわりなく精製されること。
AEXは、EmptyとFullの分離が可能であり、微妙な電荷の違いが存在することを示唆している。
この文献では、AffinityとAEXを使用することで精製プラットフォームを提案している。
Affinity精製サンプルのAUC分析では、多数のピークが確認され、Full以外のEmptyやその他のCapcid蛋白質などの不純物が多く含まれていた。
Affnity後のAEX精製サンプルのAUC分析(UVモニター)では、1つの主ピークを認め、精製度が上がっている画分は、AEXのクロマトプロファイルとしてA260/A280比は、1を超えておりFull画分と考えられた。
```
編集履歴
2019/09/18 はりきり(Mr)
2020/06/12 整備(Gutenberg blockに変換)
```
精製方法の骨格
Affinityクロマト→イオン交換クロマト
対象文献
Universal Method for the Purification of Recombinant AAV Vectors of Differing Serotypes, 2018
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5767896/pdf/main.pdf
参考文献
AVB SepharoseTM High Performance, GE Healthcare
https://www.gelifesciences .co.jp/catalog/pdf/28920754ab.pdf
アデノ随伴ウイルス精製用アフィニティー担体 – GE Healthcare –
https://www.gelifesciences.co.jp/catalog/1259.html
POROSTM CaptureSelectTM AAV Resins: AAV8, AAV9, AAVX – Thermo Fisher –
https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/100038399_POROS_CapSel_AAV8_AAV9_Resins_UG.pdf
Enabling Custom Solutions for Downstream Processing for Future Therapies: AAV Case Study, BioProcess International, 2016 – bioprocess international –
https://bioprocessintl.com/ask-the-experts/aav-case-study-poros-resins-captureselect-ligand-webcast/
編集履歴
2019/09/18, Mr. Harikiri
2021/11/02,記載整備
2019年9月18日
[Data Link] Purification of rAAV-1 and -9 with ultracentrifugation-free technique towards GMP production.(2013-2015, 科研費研究) – ID2225 [2019/09/15]
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Purification of rAAV-1 and -9 with ultracentrifugation-free technique towards GMP production: https://kaken.nii.ac.jp/ja/file/KAKENHI-PROJECT-25460407/25460407seika.pdf
UFP-750-E-3MA: https://www.gelifesciences.co.jp/catalog/1140.html
Highly Efficient Ultracentrifugation-free
Chromatographic Purification of Recombinant
AAV Serotype 9: https://www.cell.com/molecular-therapy-family/methods/pdfExtended/S2329-0501(18)30111-6
2019年9月15日
[Data Link] 遺伝子治療臨床研究実施計画書 – ヒトβ型インターフェロン発現プラスミド包埋正電荷リポソーム製剤を用いる進行期腎細胞癌の遺伝子治療臨床研究 – □ID2223 [2019/09/15]
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ヒトβ型インターフェロン発現プラスミド包埋正電荷リポソーム製剤を用いる進行期腎細胞癌の遺伝子治療臨床研究
https://www.wam.go.jp/wamappl/bb11gs20.nsf/0/63450808314386fa49257665000ffdee/$FILE/20091105_1shiryou3-1_2.pdf
2019年9月15日
[Data Link] 遺伝子治療に関する規則について – ID2221 [2019/09/15]
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H30 厚生労働省
https://www.kantei.go.jp/jp/singi/kenkouiryou/genome/advisory_board/dai4/siryou3-3.pdf
2019年9月15日
[Data Link] 「遺伝子治療製品の過去・現在・未来」H27 – ID2218 [2019/09/15]
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平成27年度国立薬品食品衛生研究所シンポジウム「新しい法律に基づくレギュラトリーサイエンス􏰀推進」
ー医薬品医療機器等法、健康・医療戦略推進法ー
遺伝子治療製品􏰀過去・現在・未来
http://www.nihs.go.jp/oshirasejoho/symposium/documents/H27_suraido_3.pdf
2019年9月15日
[rAAV-Edu] AAVベクターに関する「生物多様性影響評価書」の作成 – [2019/09/15]
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ID2177
生物多様性影響評価書
rAAVなどを用いた遺伝子治療による治験を予定している場合、当局申請のための生物多様性影響評価書の作成が必要である
生物多様性影響評価書の記載内容は以下の通りである。
- 自然界における分布
- 歴史
- 特性
- 調製方法(作り方)
- など
参考文献
カルタヘナ法の「第一種使用規程承認申請書」及び「生物多様性影響評価書」に関する作成ガイダンスの策定
https://www.amed.go.jp/news/seika/kenkyu/20191127-02.html
pmdaによる生物多様性影響評価書の作成ガイダンス
https://www.pmda.go.jp/files/000221590.pdf
カルタヘナ法
https://www.biodic.go.jp/bch/cartagena/s_05.html
生物多様性影響評価書の具体例
AAV-hAADC-2 (自治医大) 生物多様性影響評価書
https://www.amed.go.jp/news/seika/kenkyu/20191127-02.html
ネットにあった生物多様性影響評価書の実例(AAV vector)
https://www.mhlw.go.jp/shingi/2006/02/dl/s0201-5e2.pdf
2019年9月15日

[Bio-Edu] AAV およびrAAV vector について- 長所/短所、立体構造、分子量および血中半減期及び他ベクターとの比較[2020/11/05]

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はじめに

遺伝子治療用に使用されるウイルスベクターには、AAVの他にLentivirus, Retrovirusがありますが、これらは、物理的な強度がAAVと比較して低いため精製での扱いに注意が必要です。例えば、Lentivirusは粒子サイズも大きく物理的な強度が高くありません。具体的には、pH6~8、<500mM NaCl, 低温(+4℃)で精製環境を整える必要があります。

その点、AAVは、粒子サイズが低く、様々な条件でレジスタンスです。

AAV

AAVは一本鎖DNAのアデノウイルス科に属するウイルスで、アデノウイルスが存在する時だけ、増殖が可能である。

AAV遺伝子はITR(inverted terminal repeat)と呼ばれる両末端にヘアピンのT型の配列があり、AAV自身の増殖と宿主細胞の染色体DNAへの組込み時に機能する。

ITRで挟まれた配列には、左側には非構造蛋白質をコードスするRep領域、右側にはウイルス粒子を形成するカプシド蛋白質であるVP1, VP2及びVP3をコードするCap領域がある。

宿主細胞の第 19 番染色体長腕の AAVS1 領域(19q13.3-qter)へ組み込まれるが、実験的には，AAVS1 領域と ITRの間を取り持つのが、 Rep(結合領域の両者に共通して存在する塩基配列 : GAGC 繰返し配列)に，Rep78/Rep68 が結合することで、特異的に組み込まれる。

参考

コスモバイオ: tps://www.cosmobio.co.jp/support/technology/a/adeno-associated-virus-aav-apb.asp

AAV を利用した遺伝子治療、小澤敬也: http://jsv.umin.jp/journal/v57-1pdf/virus57-1_047-056.pdf

AAVを遺伝子治療に活用

PackGeen

AAVの構成蛋白質と構造 (文献1)

外殻蛋白質が60個でAAV粒子を構成しており、その比率はcap領域にコードされている蛋白質VP1, VP2及びVP3が1:1:10とある。そこから推察するに、(VP1+VP2+10(VP3))を1単位として、5単位あれば、60個の外殻蛋白質となり計算があう。

すなわち、VP1 x 5, VP2 x 5, VP3 x 50で構成さそれていることになる。

[VP1+VP2+10(VP3)] x 5
VP1: 82kDa, VP2: 65kDa, VP3: 60kDa (文献2)
(82 + 65 + (10 x 60) ) x 5
以上から、理論分子量は、3735kDa
粒子分子量: 3,600kDa (文献2)
遺伝子: 1,500kDa (文献2)

2009年時点で、AAVの血清型,1,2 4,5および8で結晶構造が決定されており、6,9では部分的に決定されてる。現在2019では、ほとんどが決定されているはず。

AAVの結晶構造は、おそらく1,2,4,5,6 8および9で決定されている – PDB search “adeno associated”
AAV1 3D Structure by PDB(3NG9), 5EGC
AAV2 3D Structure by PDB, PDB(3J1S)
AAV4 3D Structure by PDB
AAV5 : 3NTT
AAV6 3D Structure by PDB(3OAH)
AAV8 3D Structure by PDB
AAV9 3D Structure by PDB, 6NXE

血中半減期 (文献1)

AAV8, 9 (robust serotype)を用いたAAVベクターは、静脈内投与で高い効率で肝細胞、骨格筋細胞、心筋細胞に遺伝子を導入できる。AAV9の血中半減期は、半日。一方、高い遺伝子導入が可能なアデノウイルスは、血小板に吸着して血小板凝集体となり網内系での除去、肝クッパー細胞による除去などで、血中半減期は、2分程度である。

血中半減期は、細胞への吸着、網内系除去に関わる
必ずしも、血中半減期が遺伝子導入効率と相関しない
AAV9 : 半日
アデノウイルスベクター : 2分

文献

急速に進化をつづけるアデノ随伴ウイルスベクターカスタムメイドベクターによる遺伝子治療の可能性: https://www.jstage.jst.go.jp/article/dds/24/6/24_6_582/_pdf
https://www.wam.go.jp/wamappl/bb11GS20.nsf/0/9925e31f10c2c89d4925720a00083512/$FILE/shiryou3-1_5.pdf
アデノ随伴ウイルスベクターと遺伝子治療 (1997): https://www.jstage.jst.go.jp/article/jsv1958/47/2/47_2_221/_pdf

長所

AAVは非病原性である(P1での取り扱いが可能)
導入させる遺伝子は、長期に渡り発現されると考えられている
色々な細胞に遺伝子を導入可能 (ただし血清型での違いあり)
AAVはパルボウイルス科に属し、物理的に安定 (pH3~9, 56℃ 1時間, 文献2)

短所

ウイルス粒子(~22nmφ)は小さく、導入遺伝子の大きさが5kbp以内に制限される
成人の過半数が中和抗体を有するため、成人での投与では導入効率が低い可能性がある(ある程度の産生される蛋白量が必要な疾患、例えば血友病などでは、中和抗体の存在濃度は治療効果に重要な因子であることから、中和抗体価のスクリーニング系の構築も重要であるとのこと)
ベクター作成は、発展途上段階であり技術は未成熟である

インパクト

血友病などの補充療法に使用する深部出血に対して予防効果が完全でない血液分画製剤や遺伝子組換え製剤は、近い将来凌駕され遺伝子治療法に置き換わる(BY はりきり(MR))

文献

Vectorの比較

表1.ウイルスとしての比較

比較項目	Adenovirus	AAV	Lentivirus
Infection efficiency (感染率)	100%	30~40%	~30%
Packaging Capacity (遺伝子量)	7.6 kb	4.0 kb	8.5 kb
Integrate with host genome (ゲノムへの取り込み)	No	Yes	Yes
Pathogenic (病原性)	Yes	No	Yes
Inflammatory response in vivo (炎症)	High	Low	Low

SignaGen Laboratories home page

表2. Adenovirusの優位性

比較項目	Adenovirus	AAV	Lentivirus
Infects many different human cell types	Yes	Yes	Yes
Infects both dividing and non-dividing cells	Yes	Yes	Yes
Non-integrating virus	Yes	No	No
High level of protein expression (up to 10-20% total protein)	Yes	No	no
Ability to accommodate long inserts (up to 8 kb)	Yes	No	No
Easy to scale-up/amplify	Yes	No	No
Easy to get titers > 1e10 IFU/mL	Yes	No	No
Easy to get a multiplicity of infection > 25 copies per cell	Yes	No	No

SignaGen Laboratories home page

[Vc] アデノウイルス・ベクター・ワクチンとは – 新型コロナウイルスのワクチン開発で威力を発揮する – 必要な遺伝子のみを残す試行錯誤で、現在は第三世代 [2021/02/26] ID19393

編集履歴
2019/09/15 Mr.はりきり
2020/08/03 文言整備、アデノウイルス・ベクター関連記事の追加
2020/10/05 追記 (Pall webinar, 2020/11/05)

2019年9月15日

[Data Link] rAAV vector/遺伝子治療薬に関する文献調査 [~2020/08/24] – ID2033 [2019/09/13]
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Key Considerations in Gene Therapy Manufacturing for Commercialization, 2018 – Cell Culture DISH
(1) Phase 1 Clinical Study: 18 month (breakthrough), Several months (Traditional BLA)
(2) Decision on BT Application: – (BT), N/A (TD)
(3) EOP 1 Meeting Confirms BT Therapy Study: 6 months (BT), N/A (TD)
(4) Phase 2/3 Clinical Study: 24 months (BT), P2:Several Mo. to 2y and P3:1 to 4y (TD)
(5) EOP 3/Pre-NDA/Pre-BLA Submission Meeting: -, –
(6) NDA/BLA Preparation: 6months(BT), – (TD)
(7) NDA/BLA Review: 6months(BT), 10months(TD)
(8) Development Timeline: ~5.2y (BT), ~7.4y(TD)
・Plasmid Manufacturing : Fermentation→Plasmid Recovery→Purification→Fromulatiion→(Transfect)
・Viral Manufacturing: Expand→(Transfect)→Clarification→Concentration→Purifiation→Sterilization→(Activate & Modify)
・Cell Processing: Isolate & Enrich→(Activate & Modify)→Expand→Harvest→Formulation

Viruses used: Retrovirus, Lentivirus, AAV and Adenovirus.
iCELLis Nano, 500の情報、Allegro single use bioreactor
DSP platform : 3 chromatography system.
Transfection System
Analytical Method
https://cellculturedish.com/wp-content/uploads/2018/09/Key-Considerations-Gen-Therapy-Manufacturing-Commercialization.pdf
Methods Matter — Standard Production Platforms For Recombinant AAV Can Produce Chemically And Functionally Distinct Vectors, 2019 –
https://www.biorxiv.org/content/10.1101/640169v2.full.pdf
Pharmacology of Recombinant Adeno-associated Virus Production, 2018 – mol Ther Methods Clin Dev. 2018 Mar 16; 8: 166-180 –
ベクターが大きいとFull率は低下する。トリプル-インフェクションでは、更にfull率は低下する。

rAAV2-FIX vectors in A549-derived producer cell line
(1) full particels : 8%~13%

rAAV2 vectors inHEK293 cells
(1) full particles : up to 74% for a 3.4kb-vector, 40%~45% for a 4.2kb-vector
(2) full particles: 8% and 10%~12% by triple-transfection
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5908265/
Manufacturing of viral vectors for gene therapy: part I. Upstream processing, 2014 – Pharmaceutical BIOPROCESSING –

https://www.openaccessjournals.com/articles/manufacturing-of-viral-vectors-for-gene-therapy-part-i-upstream-processing.pdf
Pharmacology of Recombinant Adeno-associated Virus Production, 2018
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5908265/
In Vitro Packaging of Adeno-Associated Virus DNA ,1998
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC109794/
Pharmacology of Recombinant Adeno-associated Virus Production
Magalie Penaud-Budloo, Achille François, Nat, 2018
Next-generation AAV vectors—do not judge a virus (only) by its cover , 2019, AviGen GmbH source – ベクター開発、発現制御、プロモーター
CATAPULT, UKにおける遺伝子治療、Cell Therapy, Viral Vectors, 製造・分析、クリニカル、Webinar開催など、網羅的に関係する情報の宝庫 soruce
Production of Recombinant Adeno-associated Virus Vectors Using Suspension HEK293 Cells and Continuous Harvest of Vector From the Culture Media for GMP FIX and FLT1 Clinical Vector, 2018
A scalable method for the production of high-titer and high-quality adeno-associated type 9 vectors using the HSV platform, 2016
Enhancement of Adeno-Associated Virus Infection by Mobilizing Capsids into and Out of the Nucleolus
, (2009) AAV2の感染時、核小体への導入効率の向上薬剤(MG132とHU)
Scalable Production of AAV Vectors in Orbitally Shaken HEK293 Cells (2019)
Quantification of Adeno-Associated Virus Particles and Empty Capsids by Optical Density Measurement (2003)
特許公報(B2)_アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）血清型９の配列、それを含むベクターおよびその使用、配列が特許になっている。
特許公報(B2)_アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）血清型８の配列
AAVベクターの製造・品質に関するリフレクションペーパー (pmda
https://www.pmda.go.jp/files/000221591.pdf
平成29年度我が国におけるデータ駆動型社会に係る基盤整備「根本治療の実現」に向けた適切な支援のあり方の調査
https://www.meti.go.jp/meti_lib/report/H29FY/000111.pdf
遺伝子組換え生物に係る
法規制の動向について
独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジーセンター (Biological Resource Center, NITE ; NBRC)
https://www.kansai.meti.go.jp/2-4bio/kansai_smartcell/180925_4.pdf
バイオ戦略の策定に向けた検討
バイオテクノロジーによるイノベーションを通じて実現を目指す経済社会像(ビジョン)
https://www8.cao.go.jp/cstp/tyousakai/bio/1kai/siryo4.pdf
遺伝子治療とゲノム編集治療の研究開発の現状と課題
Since 1874
https://www.kantei.go.jp/jp/singi/kenkouiryou/genome/advisory_board/dai4/siryou4-1.pdf
ウイルスを基盤とした遺伝子治療薬の臨床開発の
現状と今後の展望
https://www.jstage.jst.go.jp/article/dds/34/2/34_99/_pdf/-char/ja
ex vivo遺伝子治療用製品の品質管理戦略の留意点
Points to consider on quality control strategy for ex vivo gene therapy products
http://jsgt.jp/CLINICAL_STUDY/2018-1pmda.pdf
脳卒中に対する遺伝子治療の現状と将来
http://cbfm.mtpro.jp/journal2/contents/assets/016030167.pdf
AAV を利用した遺伝子治療
小澤敬也
http://jsv.umin.jp/journal/v57-1pdf/virus57-1_047-056.pdf
アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターによる遺伝子治療　(2003)
AAP (Assembly Activating Proteins)
A Quantitative Dot Blot Assay for AAV Titration and Its Use for Functional Assessment of the Adeno-associated Virus Assembly-activating Proteins
生物多様性影響評価書
科学研究費助成事業研究成果報告書
適正製造規範に適合する簡易精製が可能な次世代AAVベクターの開発
PMDA
厚生労働省精神・神経疾患研究委託費
遺伝性筋疾患に対する分子治療の基盤研究
病原体検出マニュアル　(国立感染実用研究所)
2019年9月13日

[Bio-rAAV] 遺伝⼦治療における代表的な委託製造会社 (CMO) – ID1881 [2021/02/08]

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rAAV vectorを製造するCMOリスト

企業サイト	サイト	製造サイト	特徴	関係
WuXi Advanced Therapies	US	1,000L	遺伝子治療医薬品の開発と製造、AAV vector suspension platform	WuXi AppTec
Catalent	US, EU,footprint(400,000ft23)	10 cGMP clinical suites, 200L, 400L, 800L, 2 x iCELLis 500, 24 HYPERStack 26/CS10 10 cGMP Commercial Campus (including fill/finish)	>バイオ医薬品30年の経験、20クライアント, AAV vector, 60 prgramp	Original
BioReliance	Rockville, Maryland, USA & Ireland	Viral/Cell banking to fill finish (2,000 v/day), Secure Biostorage	ウイルス・クリアランス試験、Carsbadとの遺伝子治療用製品の開発と製造	BioRelianceとCarlsbad(20+ years)がサービスする, California,親会社: Millipore-SIGMA-Merck
Oxford Biomedica	UK	UK(1,200m2, SUB 200L, BSL-C3 Lab)	遺伝子治療医医薬品、PCL(*1)、Gene Therapy	SANOFI, GSK, NOVARTIS Broucher
Lonza Pharma & Biotech	US	Huston,Portsmouth, Holland, Singapore, Japan(Nikon)	バイオロジクス、遺伝子治療医薬品、AAV, HSV, NDV,(Anc-AAV)	Original
Novasep	EU		バイオロジクス、遺伝子治療医薬品、Adeno, Lenti, HSV, VSV, VEEV	2021/01/15 ThermoFisherによる買収
MolMed	EU
YposKesi	FR	~500L ~200L SUB, 24 x Cell Factory 10	遺伝子治療医薬品	2016, Genenthonからスピンオフ
TAKARA BIO	JP		遺伝子治療医薬品
IDファーマ	JP		iPS, CRISPR-Cas9	elixirgen therapeutics
遺伝子治療研究所 (Gene Therapy Research Institution)	JP		遺伝子治療医薬品
vigene biosciences (2012~)	Rockville, Maryland	CellSTACK; iCELLis, 50~500L bioreactor, HEK293	Plasmid製造、小規模AAVから臨床(GMP)まで、AAV、レンチウイルス	Original (Small company)
patheonby ThermoFisher 詳細	Alachua, FL Cambridge, MA Lexington, MA Plainville, MA, US	50L~2000L	Florida Bio (2006~2016), 100 clients, 500 product released	14+years, Brammer BioがPatheonに統合
VIROVEK 詳細	Hayward, CA, US	SF9/vaculovirus	1e13 vg/$3,500 ~ >1e15 vg/$119.900 価格表あり	2006~

https://www.kantei.go.jp/jp/singi/kenkouiryou/genome/advisory_board/dai5/siryou4-2-8.pdf

Merck Darmstadtは、Millipore (2010), Sigma-Aldrich(2015)を傘下に収めて
https://ja.wikipedia.org/wiki/メルク_(ドイツ)

編集履歴

2020/07/17 Mr.Harikiri
2021/02/08 追記 (ThermoFisherによるnovasepの買収)

2019年9月7日

[Bio-Edu] バイオロジクスの研究開発から商用製造
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序
作用機序から目的バイオロジクス(モノ)を探索し、発現系構築・精製法検討を進めながら、試験管レベルでのヒットを得る。
モノの培養・精製による取得と並行して、動物での薬理的効果を確認しながら、製造スケールは徐々に大きくしていく。最終的はに、商用スケールを目指しているためだ。
以下、もう少し詳しくその流れを見ていこう。
基礎的検討 (Stage 0)
薬を世の中に出すことは大変な労力と時間およびお金がかかります。バイオロジクスでいうと、病気に効きそうな蛋白質(など)が特定され、そこから5年〜7年程度かけて基礎的検討が行われ、やがて研究成果もでてきつつ、商用生産スケールの培養スケール(1000倍以上)で製造がと可能となり、培養・精製が恒常的に実施可能な状態になります．ここまでで更に5年程度かかります。
- 目的疾患とバイオロジクス
- 遺伝子配列、発現系構築、精製法検討開始
- 特許調査・特許出願
- 評価系構築
- 物取り、試験管レベルの評価(細胞など)
- 動物を用いた評価
- 毒性否定試験
- 特性解析、安定性試験
- ヒトでの安全性試験開始
プロセスバリデーション
Stage 1: Process Design
これまでに実施した開発・スケールアップの知識から商用製造プロセスを定義する段階
- QbDアプローチ、実験計画法による開発、段階的なリスクアセスメントの実施によるリスク低減化、CQA,
- 培養条件、精製条件それぞれについて、各パラメータの範囲を定義していく段階
- 分析系バリデーション
技術移転プロジェクトを立ち上げ、研究所と製造サイトの共同作業により技術移転が推進される段階。
- 培養の技術移転および精製の技術移転
- Stage 2に備えます
Stage 2: Process Qualification
定義したプロセスが再現性よく商用生産できることの確認する段階
安定稼働プロジェクトを立ち上げ、研究所がサポートしながら、工場が主体で安定稼働を確認が推進される段階
- 3ロットの製造の実施で確認
- 安定性試験の開始
- 特性解析による物性の確認
Stage 3: Continued Process Verification
継続的な検証により、ルーチンで実行している商用製造がコントロール下(最近のトレンドは、PATによるリアルタイムモニタリングによるデータ比較)にあることの確認を得る段階
*1: PAT: Process Analytical Technlogy。説明は、ここを参照できます。
- レーザー解析: 原薬粉砕工程での粉砕粒子径のモニタリング
- NIR (拡散反射法): 造粒中の水分
- NIR(透過法): 打錠工程の製剤均一性
参考
FDA, Guidance for Industry Process Validation: General Principles and Practices (22 page of all)
2019/12/17 改定
2019年9月7日

カテゴリー: BIOLOGICS

はじめに

文献の内容

精製方法の骨格

対象文献

参考文献

編集履歴

生物多様性影響評価書

参考文献

はじめに

AAV

AAVを遺伝子治療に活用

AAVの構成蛋白質と構造 (文献1)

血中半減期 (文献1)

文献

長所

短所

インパクト

文献

Vectorの比較

表1.ウイルスとしての比較

表2. Adenovirusの優位性

AAP (Assembly Activating Proteins)

科学研究費助成事業 研究成果報告書

PMDA

rAAV vectorを製造するCMOリスト

編集履歴

序

基礎的検討 (Stage 0)

プロセスバリデーション

Stage 1: Process Design

Stage 2: Process Qualification

Stage 3: Continued Process Verification

参考

科学研究費助成事業研究成果報告書