カテゴリー: BIOLOGICS

CHTについて

• BIO-RAD製品
• 通常は、針状結晶で脆い結晶性ハイドロキシアパタイト(リン酸カルシウム)を、ある程度の結晶サイズに整えて、それを集めてある程度の粒子サイズにし、焼結することで物理的に強固にした製品
• 製品名は、CHT セラミックハイドロキシアパタイト、(Ca₅(PO₄)3OH)₃ 
• 精製が困難な蛋白質などのポリッシング用担体

結晶ハイドロキシアパタイト

• (Ca₅(PO₄)3OH)₂
• リン酸カルシウムの一種です
• 5つの 2- カルシウム (C-sites) と 2 つのヒドロキシル含有 3- リン酸 (P-sites) が反復する幾何学的なパターンで配置
• 本材料の電子顕微鏡像では、反復する六方晶構造
• 六角面がCaが配置されているため、陰イオン交換作用がある
• 円柱面は、リン酸が配置されているため、陽イオン交換作用がある

CHT製品

• 2 タイプの CHT セラミックハイドロキシアパタイト
• タイプ I およびタイプ II は 3 つの粒子サイズ、20、40、および 80 µm
• どちらのタイプも結晶性ハイドロキシアパタイトと同等の溶出特性を持つが、いくつか重要な違いがあります。

• 400°C で焼結したタイプ I は、より高いタンパク質結合能を示し、酸性タンパク質に対してより優れた容量を有します
• 700°C で焼結したタイプ II は比較的低いタンパク質結合能を有しますが、核酸および一部のタンパク質の分解能に優れます。また、アルブミンとの親和性が非常に低く、多くの種および綱の免疫グロブリンの精製に非常に適しています。

• 

ヒドロキシアパタイトには、正電荷を持つカルシウムと負電荷を持つリン酸基の 2 種類の結合部位があります。 これらの部位は、マトリックスの結晶構造を介して定期的に分配されます。 溶質種は主として、リン酸基を介した陽イオン交換および/またはカルシウム原子を介した金属アフィニティーによって相互作用します。

CHT セラミックハイドロキシアパタイト Type II 担体, BIO-RAD

https://www.bio-rad.com/ja-jp/product/cht-ceramic-hydroxyapatite-type-ii-support?ID=a642d16e-5ca8-4981-acf2-a57271984632

製品タイプ別

Type	Particle Size (μm)	焼結温度(℃)
I	20	400
I	40	400
I	80	400
II	20	700
II	40	700
II	80	700

仕様書

機能グループ	Ca2+、PO43-、OH
さまざまな粒径が使用可能	20、40、および 80 µm (公称値)
推奨される線流速	50 ～ 1,000 cm/時
動作 pH 範囲	6.5–14
化学的適合性 (>24 時間)	1 M NaOH、8 M 尿素、8 M 塩酸グアニジン、エタノール、メタノール、100% アセトニトリル
再生	0.4 ～ 1.0 M リン酸バッファー、0.5 M リン酸ナトリウム pH 7 リン酸 3 ナトリウム 1.0 M、pH 11 ～ 12
消毒	1 ～ 2 N NaOH
オートクレーブ滅菌 ( 121µC、20 分)	はい
充填密度 (g/ml 充填ベッド)	0.63 g/ml
	タイプ I	タイプ II
動的結合能	>25 mg リゾチーム/g	>12.5 mg リゾチーム/g
標準的な IgG 結合能 (500 cm/時の場合)	25 ～ 60 mg/ml	15 ～ 25 mg/ml
公称孔径	600–800 Å	800–1,000 Å
最大動作圧力	100 bar (1,500 psi)	100 bar (1,500 psi)

セラミックヒドロキシアパタイトの特徴

	タイプ I	タイプ II
観察された IgG の動的結合能	25 ～ 60 mg IgG/ml CHT*	15 ～ 25 mg IgG/ml CHT**
標準的な線流速の範囲	50 ～ 1,000 cm/時
pH 安定性***	6.5 ～ 14 pH
ベース安定性	1 N NaOH で 21 か月以上
再生	500 mM リン酸ナトリウム、pH 7
	リン酸 3 ナトリウム 1,000 mM、pH 11 ～ 12
オートクレーブ滅菌 (バルク)	121°C、リン酸バッファーに 20 分、pH 7
消毒	1 ～ 2 N NaOH
推奨されるカラム保管法	0.1 M NaOH
有効期限 (ドライ、未使用原料)	乾燥し、密閉され、室温で 85 か月保管

* 40 µm 粒子、300 cm/時、5 mM リン酸ナトリウム、pH 6.5
** 40 µm particles, 300 cm/hr, 5 mM sodium phosphate, pH 6.5
*** pH 5.5 ～ 6.0 については、セクション 3.1.1 バッファーおよびテーブル 1 を参照してください

編集履歴
2020/02/20 Mr.はりきり
2020/07/29 文言整備