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[Bio-Lab] Slide-A-Lyzer Dialysis Cassette – タンパク質サンプルのバッファー置換 – 昔は、透析チューブを使っていたが今はバカチョン – ID8580 [2020/09/16]

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[Bio-Lab] Slide-A-Lyzer Dialysis Cassette – タンパク質サンプルのバッファー置換 – 昔は、透析チューブを使っていたが今はバカチョン – ID8580 [2020/09/16]
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ラボ製品

透析膜・カセットシステムの用途

現在は、この製品が簡単な操作が可能なため、良く使われます。

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  • 精製タンパク質のバッファー交換

昔は透析チューブを使っていた

旧研究者は、ロールになった透析膜を必要な長さにはさみで切って、煮沸して保存剤であるグリセロールを取り除くと共に、柔らかくした後、精製水でよくもく洗いして透析チューブにして使用していました。透析チューブは、まず、一方の端を一回結びします。もう一方から、ロートを使ってサンプルを流し込みます。その後、その一方の端を少し空気を入れて結び、透析チューブとします。

希釈率

  • 1,000倍以上を目指す
  • サンプル量と透析バッファーの液量をもと除算して計算する

操作方法

  1. サンプルをカセットに注射針と注射筒を使って注入
  2. 希釈率から必要な液量の透析バッファーを準備する
  3. 透析バッファーにカセットを投入して、スターラーバーにより撹拌する
  4. 本来は、カセット内の液と透析バッファーをサンプリングして電気伝導度を測定して、透析操作の完了時期を確認するのが良いが、一般的には、1回の透析バッファーでの操作の場合、一晩を目安にする
  5. 2回目の新しい透析バッファーでの操作を実施する場合は、1回目を5時間程度、2回目を一晩とする
  6. 透析操作が完了したカセットを取り出し、注射器でサンプルを取り出す

メリット・デメリット

  1. サンプルの液量が増えてしまいます
  2. TTFのDiafiltrationと比較して、準備する透析バッファーの液量が単純希釈率に相当するため多くなる
  3. 膜の分画サイズに関わりなく使用液量で希釈率が計算できるTFFと比較して、カセットの場合、分画サイズごとに、透析速度が異なり透析終了時期が分かりにくい

Slide-A-Lyzer Dialysis Cassette

https://www.thermofisher.com/jp/ja/home/life-science/protein-biology/protein-purification-isolation/protein-dialysis-desalting-concentration/dialysis-products/slide-a-lyzer-dialysis-cassettes.html

ここまで

< 本編はここまで。

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