[rAAV] 製剤組成 – rAAV8の製剤組成 – 特許文献から – ID7881 [2020/01/23]

• 優先権: US
• 公開特許公報(A) 2019-537578
• 公開日　2020/01/12
• 審査請求　未
• 予備審査請求　未
• 出願人 BAXALTA INCORPORATED

特許の流れ

• 液体及び凍結乾燥
• 5mM ~ 25mM L-Histidine, 0mM~150mM NaCl, 0.001%(w/v)~0.1%(w/v) Polysorvate 80, 1% ~ 10% (w/v) Sucrose and/or トレハロース　(Glycine or mannitol)
• AAVを含む医薬組成物
• 出血性疾患を治療する方法
• pH6.9~7.7 (7.0 ~ 7.5)
• PS80: Croda SuperRefined (商標)
• AAV1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10
• AAV8　(本名)
• 容器への吸着を防ぐ、分解凝集の抑制
• 凍結乾燥では、30mM~70mM Glycine (実施例のほとんどにGlycineが含まれる)
• Lypではね含水率0.2%以下(カールフィッシャー滴定法)

実施例

• 10mM L-Histidine, 20mM NaCl, 0.005% PS80, 5% トレハロース, 50mM Glycine → 凍結乾燥
• 10mM L-Histidine, 100mM NaCl, 0.005% PS80, 5% トレハロース, 50mM Glycine → 液体製剤

安定性が高い例(粒子サイズ別粒子数の変動が少ない)

• Buffer-1: Chatham buffer, 0.005% pS80(Osm 990)
• Buffer-2: 20mM Histidine, 70mM NaCl, 5% Sucrose, 0.005% PS80, pH7.5 (Osm 309)
• 5℃、-20℃, -60℃
• 製剤4の組成: 10mM L-Histidine, 100mM NaCl, 50mM Glycine, 5% Toreharose, 0.005% Croda super refined Tween80, pH7.0

分析

• SDS-PAGE
• WAX(弱陰イオン): 完全カプシド測定
• SEC
• in vitro生物活性
• in vivo生物活性
• FIX-qPCR (第9因子)
• rAAV8 ELISA
• 外観
• pH
• Polysorbate 80

AAV2は人のゲノムの染色体19q13.4中に組み込まれて潜伏するDNS Virus

rAAVの特徴:

• ウイルス複製に必要なRep遺伝子の除去
• 部位特異的組込みに必要な因子の除去
• 染色体外状態で存在する
• ゲノムDNAへの組み込み効率は非常に低い

先行文献

• Data and Berns, Clinical Microbiology Reviews, Pages 583-593 (2008)