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HPLCの分離度と定量限界

分離度（Resolution）

HPLCにおける分離度（Resolution）は、隣接するピークの分離状態を定量的に表す指標であり、以下の参考文献に基づいて定義されています。

日本薬局方（第十八改正）では、分離度が1.5以上であることが、「隣接するピークが完全に分離している」とされる基準の目安となっています。

また、JIS K 0124:2011（高速液体クロマトグラフィー通則）においても、分離度の定義および評価法が規定されており、試験法の妥当性確認の一環として用いられます。

分離度の算出には以下の式が一般的に用いられます（詳細は参考文献を参照）：

Rs = 2(tR2 - tR1) / (w1 + w2)
  

• tR1, tR2：各ピークの保持時間（早い順）
• w1, w2：それぞれのピーク幅（ベースライン幅）

この値が1.5以上であれば、ピークがベースライン上で完全に分離されていると見なされます。 ただし、分析目的や対象物によっては、1.5未満でも定量が可能な場合もあるため、試験法設定時には実用的な判断が必要です。

定量限界（Limit of Quantification, LOQ）

定量限界は、分析対象物質を定量的に測定可能な最小濃度または量を示す指標であり、以下の式によって推定されます：

定量限界（LOQ） = 10σ / S
  

• σ：試料中のノイズ（残差）の標準偏差
• S：検量線の傾き（感度）

この式は、分析のばらつきと感度から求められるものであり、分析法の妥当性評価において重要な指標です。

参考文献

• 分離度とは?｜島津製作所
• 日本薬局方 第十八改正：一般試験法「液体クロマトグラフィー」
• JIS K 0124:2011 高速液体クロマトグラフィー通則

編集履歴

2024/06/27 Mr.Harikiri
2025/06/21 修正

承認事項

PMDAの各種関連通知にある以下の通知をもとにして医薬品における新規製造販売承認申請における承認事項について解説する．

通知番号等	通知名称
平成30年3月9日 薬生薬審発0309第1号 薬生監麻発0309第1号	医薬品の品質に係る承認事項の変更に係る取扱い等について

承認事項

承認を受けた申請に係る承認書に記載された事項．

品質に係る承認事項

前述の承認事項のうち，申請書または届書において以下の欄に記載された事項

1. 「成分及び分量又は本質 (成分の規格 (別紙規格*1を含む) )」
2. 「製造方法」
3. 「貯蔵方法及び有効期間」
4. 「規格及び真剣方法」
5. 「製造販売する品目の製造所」
6. 「原薬の製造所」

*1 : 「成分の規格」に記載する内容には一般的に，成分が日局のものを使っている場合は日局と記載されるが，それ以外の場合，申請者が「別添規格」と記載して，日局の記載方式にならった様式で成分の規格を記載する．

医薬品等知事承認審査のための「規格及び試験方法」に関するガイドブックには「成分および分量又は本質」の例示が示されている．

申請等手続き | 独立行政法人 医薬品医療機器総合機構 – PMDA

承認申請・届出等様式ダウンロード : 医薬品医療機器法施行規則様式 (一覧)

申請電子データシステム　操作マニュアルダウンロードページ

厚生労働省法令等データベースサービス : 法令検索，通知検索，公示閲覧がオンラインで可能．

編集履歴

2024/06/21 Mr.Harikir

comparability

同等性/同質性

バイオ医薬品も主流は英語圏の海外であり，日本語で理解することは理解に誤りを生じやすい．それでも，comparabilityの日本語訳は同等性/同質性である．

ICH Q5Eステップ2ガイドライン 生物薬品 （バイオテクノロジー …

解説 : 蛋白質医薬品の主成分はタンパク質やポリペプチドでり，一般的な合成医薬品とは異なり沢山且つ複数種類のアミノ酸で構成された巨大分子である．蛋白質は細胞内で作られる(翻訳)．その後速やかに修飾(翻訳語修飾)される．修飾物は一般的に「糖」であり，その糖の種類も色々と知られている．タンパク質の生産細胞の培養条件によっては，その糖の種類や付加される割合(付加されるアミノ酸配列が決まっている)も異なるため．同一の製造方法であっても作られるタンパク質の品質は，化合物医薬品と比較して厳密には同じではない．Comparabilityを何処まで示せばよいかはケースバイケースであるが以下に示すようなステップを踏むことになる．具体的には，工程内試験，品質特性(品質試験，特性解析)，安全性，非臨床や臨床試験の組み合わせにより有用性(効力)が同等性/同質性 (comparability)を確認しなければならない．

ひとりごと :

細胞株の変更に関わるComparabilityについては，海外，特にアメリカのFDAでは臨床試験までしなくても得られるケースがあると聞く．日本のpmdaでは難しいようだが，今般，ドラッグロス/ドラッグラグの議論の中でComparabilityについて合理的に評価されるようになることが記載される．

[Bio-Analysis] Comparability Test – バイオ医薬品における同等性/同質性 – ID8641 [2024/06/1]

2020年2月2日 [Bio-Analysis] Comparability Test – バイオ医薬品における同等性/同質性 – ID8641 [2024/06/1] はコメントを受け付けていません

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2024/06/21 Mr. Harikiri
2024/08/12 追記(ひとりごと)