緩衝液のpH
緩衝液の調製に際し、そのpHは3局対応の試験法に従って測定し調整される。その測定する温度は、室温付近に規定されている。しかし、リン酸緩衝液は、室温から凍結(-30℃など)までの範囲で、大きなpH変換を生じる。
リン酸緩衝液に続いて、pH変動が大きい緩衝液は、Tris緩衝液である。抗体医薬でよく使用されているHistidine、酢酸緩衝液では、その変動は少ない。
25℃から-30℃のpH変化
- pH7に調整されたリン酸緩衝液の温度とpH変化
- pH変化は激しい
- 25℃から0℃ : pH7
- 0℃から-5℃ : 一気にpH4.5~pH5に低下
- -5℃から-30℃ : 徐々にpH変化率は低下してpH3.4に至る
- pH5.7に調整された酢酸緩衝液の温度とpH変化
- pH変化は緩やか
- 25℃から0℃ : pH5.7
- 0℃から-30℃ : 一定割合でpH6.1に至る
主な緩衝液の25℃から35℃でのpH変化
Buffer | pH at 25℃ | pH at 0℃ | pH at -35℃ |
50 mM Sodium phosphate | 7.00 | 7.02 | 3.36 |
20 mM Sodium acetate | 5.63 | 5.66 | 6.14 |
20 mM L-Histidine-HCl | 5.37 | 5.86 | 6.19 |
20 mM Histidine-acetate | 5.52 | 5.97 | 6.48 |
20 mM Sodium citrate | 6.16 | 6.49 | 5.93 |
20 mM Tris-HCl | 7.37 | 7.93 | 8.54 |
20 mM sodium Succinate | 5.55 | 5.60 | 5.85 |
Impact of Freezing on pH of Buffered Solutions and Consequences for Monoclonal Antibody Aggregation
https://www.researchgate.net/publication/40806387_Impact_of_Freezing_on_pH_of_Buffered_Solutions_and_Consequences_for_Monoclonal_Antibody_Aggregation
編集情報 2020/07/19 Mr.はりきり ID 19312
その他参考
Examining the freezing process of an intermediate bulk containing an industrially relevant protein
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022915000046
以上