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緩衝液のpH

緩衝液の調製に際し、そのpHは3局対応の試験法に従って測定し調整される。その測定する温度は、室温付近に規定されている。しかし、リン酸緩衝液は、室温から凍結(-30℃など)までの範囲で、大きなpH変換を生じる。

リン酸緩衝液に続いて、pH変動が大きい緩衝液は、Tris緩衝液である。抗体医薬でよく使用されているHistidine、酢酸緩衝液では、その変動は少ない。

25℃から-30℃のpH変化

• pH7に調整されたリン酸緩衝液の温度とpH変化
  • pH変化は激しい
  • 25℃から0℃ : pH7
  • 0℃から-5℃ : 一気にpH4.5~pH5に低下
  • -5℃から-30℃ : 徐々にpH変化率は低下してpH3.4に至る
    
• pH5.7に調整された酢酸緩衝液の温度とpH変化
  • pH変化は緩やか
  • 25℃から0℃ : pH5.7
  • 0℃から-30℃ : 一定割合でpH6.1に至る

主な緩衝液の25℃から35℃でのpH変化

Buffer	pH at 25℃	pH at 0℃	pH at -35℃
50 mM Sodium phosphate	7.00	7.02	3.36
20 mM Sodium acetate	5.63	5.66	6.14
20 mM L-Histidine-HCl	5.37	5.86	6.19
20 mM Histidine-acetate	5.52	5.97	6.48
20 mM Sodium citrate	6.16	6.49	5.93
20 mM Tris-HCl	7.37	7.93	8.54
20 mM sodium Succinate	5.55	5.60	5.85

Impact of Freezing on pH of Buffered Solutions and Consequences for Monoclonal Antibody Aggregation

https://www.researchgate.net/publication/40806387_Impact_of_Freezing_on_pH_of_Buffered_Solutions_and_Consequences_for_Monoclonal_Antibody_Aggregation

編集情報
2020/07/19 Mr.はりきり
ID 19312

その他参考

Examining the freezing process of an intermediate bulk containing an industrially relevant protein

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141022915000046

以上