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  • [Bio-Equip] 培養シャーレ – セルスタック ; CellSTACK – 接着性の細胞の培養を効率的に作業できるアイデアに満ちた構造 [2021/01/20]

    [Bio-Equip] 培養シャーレ – セルスタック ; CellSTACK – 接着性の細胞の培養を効率的に作業できるアイデアに満ちた構造 [2021/01/20]

    セルスタック

    セルスタックとは，Corning CellSTACK培養チャンバーでプラスチック製の接着細胞用の多段培養シャーレです。これはもう「ラボ用」とは呼べないかも知れません。遺伝子治療用のAAVベクターの治験薬製造に使っているCMOも存在します。

    • 5段の製品 : Cell STACK5
    • 培養面積 : 3,180cm² 
    • 注入口 : 直径 26mm
    • 33mmネジキャップには 孔サイズ 0.2µm の疎水性メンブレンが直接シールされており,コンタミネーションリスクを抑えたガス交換が可能です
    • 別売りの化学薬品耐性のあるフレキシブルヒートシールチューブがついた直径 33mm ネジキャップ :培地や細胞液を直接無菌的に出し入れ可能
    • USP クラス VI に適合したポリスチレンは、光学的な透明度と機械的強度が優れている
    • γ-線滅菌済み, ノンパイロジェニックを保証
    • 出荷前に100% リークテストを実施

    ¥ 35,200 per case (2021/01)

    ポリスチレン製 セルスタック - 5チャンバー, ベントキャップ付き,　（2個/ケース）
    Refer to corning

    ポリスチレン製 セルスタック – 5チャンバー, ベントキャップ付き,　（2個/ケース）

    https://ecatalog.corning.com/life-sciences/b2b/JP/ja/アプリケーションから製品を探す/セルセラピーとワクチン/セルスタック/Corning®-CellSTACK®-培養チャンバー/p/3319?clear=true

    多品種には

    昔ながらのフラスコ(下図)があります。これは、僕がバイオを始めた40年前には、もう既に存在していました。FL細胞という細胞をこのフラスコで静置培養すると、フラスコ面にモノレイヤに増殖します。培地を取り除いた後、トリプシン溶液処理でフラスコから細胞を剥がします。得られた細胞の内の大半は、ある使用目的に使い、残りは、継代培養(CO2インキュベータ)に回します。これを3、4日のサイクルで1年中培養するわけです。当時は、10~20本を培養していました。

    Refer to ThermoFisher

    細胞培養フラスコ

    https://www.thermofisher.com/jp/ja/home/life-science/cell-culture/cell-culture-plastics/cell-culture-flasks.html
    編集履歴
2021/01/20 Mr.HARIKIRI
  • [Bio-Equip] 培養液モニタリング装置 – Cedex Bio [2020/12/10]

    [Bio-Equip] 培養液モニタリング装置 – Cedex Bio [2020/12/10]

    培養状態をモニタリングする測定装置

    Cedex Bioは、Wakoが販売する抗体医薬なのどの培養上清の組成分析、目的物の生産性など、多項目を自動で測定できる装置です。

    Cedex Bioが可能な測定項目と測定時間

    測定項目キット名測定時間※
    （分）
    AcetateAcetate V2 Bio12:00
    Ala-Gln, GlutaMAXAla-Gln Bio12:00
    CalciumCalcium Bio5:24
    CholesterolCholesterol Bio11:06
    EthanolEthanol Bio8:42
    FormateFormate Bio12:00
    GalactoseGalactose V2 Bio12:00
    GlucoseGlucose Bio11:06
    GlutamateGlutamate V2 Bio12:00
    GlutamineGlutamine V2 Bio12:00
    GlycerolGlycerol Bio6:18
    IgG FcIgG Bio8:00
    IronIron Bio9:00
    LactateLactate Bio7:30
    LDHLDH Bio10:30
    MagnesiumMagnesium Bio6:00
    Ammonia, NH3NH3 Bio9:18
    Optical DensityOD Bio2:24
    PhosphatePhosphate Bio10:12
    PyruvatePyruvate Bio9:00
    SucroseSucrose Bio11:06
    Total ProteinTotal Protein Bio9:54
    Mouse IgGMouse IgG Bio5:50
    IgG FabIg Fab Bio10:36

    Cedex Bio – Wako –

    培養上清の各種測定にるモニタリング・データを自動で得る。

    https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/equipment/products/00025.html
    編集履歴
2020/12/10 Mr.HARIKIRI
  • [Bio-Equip] Cytiva – Plasmidselect Xtra [2020/11/14] ID24783

    [Bio-Equip] Cytiva – Plasmidselect Xtra [2020/11/14] ID24783

    PlasmidSelect Xtra

    Super coilになっているplasmid DNAを精製するクロマト担体。

    Plasmidselect Xtra – Cytiva –

    製品情報

    https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ge28402401?lang=ja&region=JP&gclid=Cj0KCQiA-rj9BRCAARIsANB_4AA5wU8x343zgnrhseRB8TL5Yl5KKWze1xYOFQG3evkT1Y8S_fy_NL0aAsSJEALw_wcB

    Plasmidselect Xtra データシート – Cytiva –

    Scale-up of the PlasmidSelect Xtra process

    https://cytivalifesciences.co.jp/catalog/pdf/28409487.pdf
  • [Bio-Equip] Cytiva – AKTA Ready System

    [Bio-Equip] Cytiva – AKTA Ready System

    AKTA Ready System

    Flow Kitというシングルユースの配管キットを装置する方式のクロマト装置である。配管の洗浄が必要なく、バイオロジクスのCMOでは汎用されている。

    • クロマトプログラム
    • ピンチバルブ
    • ローラーポンプ
    • シングルユースUV
    • スキッド
    78F088D2-6FE2-47EB-B7C8-FDD0CE8C0671
    図1. AKTA Ready System & ReadToProcess Column

    https://www.cytivalifesciences.co.jp/catalog/pdf/AKTAready_Datafile.pdf

  • [Bio-Process] Affinity & Polishing chromatography – 抗体の精製 [2021/10/30]

    [Bio-Process] Affinity & Polishing chromatography – 抗体の精製 [2021/10/30]

    ID8453

    Bio-Process-Chromatography

    タンパク質精製の基本であるクロマトグラフィーには、以下のモードがある。

    抗体の精製では、長い歴史があり精製プラットフォームが完成しているため、使用するカラムの種類とその順序は検討する必要は通常ない。それぞれのクロマトの条件についても、検討範囲はある程度狭く限定するとが可能である。

    • Affinity chromatography
      • 抗体のどの部位に結合するかで、以下の3種類のタンパク質が知られている。フルレングスのIgGの場合は、Protein Aが使用される。Fc領域と親和性が高く結合する。
      • Fc領域を持たないデザインの抗体ではProtein Aは使用できない。Fc領域ではない領域と結合するProtein GやProtein Lが使用できる。
      • Protein A
      • Protein G
      • Protein L
    • IEX (Ion Exchange Chromatography)
      • 抗体の精製には、一般的な精製用の担体を用いたクロマトです。Anionは、Endotoxinやウイルスなどの吸着除去の機能を期待して使用されます。Cationは、抗体の分解物や重合体の分離を期待して使用されます。
      • Anion Exchange Chromatography
      • Cation Exchange Chromatography
    • HIC (Hydrophobic Interaction Chromatography)
      • HICは、疎水性の強弱で分離するクロマトに使用します。イオン交換クロマトで十分な精製ができない場合に使用を検討します。
      • Phenyl
      • Butyl
    • HA (Hydroxyapatite)
      • HAはマルチモーダルな特性があり、イオン交換クロマトで十分な精製ができない場合に使用を検討します。塩濃度、pH、リン酸濃度などの条件を詳細に設定することができれば、効果的な精製を可能にします。

    Protein A Column chromatography

    抗体を産生株した培養液は、清澄ろ過してから、Protein AカラムによるBinding/Elutionモードで抗体のアフィニティ精製を行う。

    注意しなければならないこと

    • 電気泳動では、抗体の染色バンドのみが確認できるので、精製度は高いと思われがちであるが注意が必要
    • HCP、HCDは多量に含まれている。そのような理由から、精製とは呼びにくく、キャプチャリング(capturing)工程と呼ばれる
    • 次工程として、少なくとも、ハイドロキシアパタイトやAEXを実施すべきである。

    AAV (rAAV)の精製においても、抗体の精製プラットフォームに従うように、レジンの開発が勧められており、Affinity resinの市販品も既に存在する。

    • Anti AAV antibody
      • Cytiva製
      • ThermoFisher製
    • Mobius® FlexReady Solutions
    • GE Healthcare

    Mobius® FlexReady Solutions

    https://www.merckmillipore.com/JP/ja/Mobius-Single-Use-Manufacturing/Mobius-FlexReady-Solutions/EcGb.qB.e04AAAFZUuNiYtcV,nav

    Single-use for Downstream, GE Healthcare –

    https://www.gelifesciences.com/en/us/solutions/bioprocessing/products-and-solutions/downstream-bioprocessing/single-use-for-downstream

    編集履歴

    2020/02/02, Mr. Harikiri
    2021/10/30, 追記(レジンに期待する機能など)