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  • [用語] QOL; quality of life; 生活の質

    [用語] QOL; quality of life; 生活の質

    QOL; quality of life; 生活の質

  • [Bio-Edu] 免疫グロブリンG; IgG [2020/02/05]

    [Bio-Edu] 免疫グロブリンG; IgG [2020/02/05]

    免疫グロブリンG ; IgG

    免疫グロブリンには、複数のタイプが存在する。微生物やウイルス感染の初期2周後に生体内では、IgMという免疫ブロプリンが産生され、初期免疫が開始される。IgMは、IgGの基本構造を1単位とすると5単位で構成されている。分子量は薬800kDa。

    その後、更に送れて2周後からIgGという免疫グロブリンが産生され、免疫反応を受け継ぐ。IgGは、2本の重鎖(ヘビーチェーン, 分子量50kDa x 2)と2本の軽鎖(ライトチェーン, 分子量25kDa x 2)からなる。

    生体内の血中では、これら免疫グロブリンが常時、ある一定量が存在しており、ある程度の病原性にたいる反応確率で免疫反応を担っている。

    この免疫反応としての病原性に対する結合性を利用して、人為的にある狙った病原性に対する結合性を持つIgGが、バイオ医薬品であるモノクローナル抗体である。

    例えば、モノクローナル抗体は、自己免疫疾患の治療薬が多数存在する。ある種の自己免疫疾患では、TNFという物質を過剰に作ってしまう疾患がある。このTNFに対するモノクローナル抗体がバイオ医薬品となっており、患者さんのQOLに貢献している。

    紹介–A new method for Antibody purification (using Poll AcroSep resin), 2009

    https://harikiri.diskstation.me/myblog/purification/14/
  • mammalian

    mammalian

    mammalian; 哺乳動物

  • [用語] ヌクレオチド : nucleotide

    [用語] ヌクレオチド : nucleotide

    nucleotide ; ヌクレオシドにリン酸基が結合した物質。ヌクレオシドは五単糖の1位にプリン塩基またはピリミジン塩基がグリコシド結合したもの。

  • [Bio-Edu] Drug development lifecycle 医薬品の開発ステージ毎の – コスト、期間、次期移行確率 by Lonza – ID8649 [2020/02/05]

    [Bio-Edu] Drug development lifecycle 医薬品の開発ステージ毎の – コスト、期間、次期移行確率 by Lonza – ID8649 [2020/02/05]

    医薬品の開発

    かかるコストについては、プログラム(研究テーマ)当たりで算出した。以下では、その項目以外特に、期間について紹介する

    • 種探しからターゲットまで
      • 1テーマ当たり、28億円
      • 4.5年
    • Pre-Clinica段階
      • 12億円
      • 1.0年
    • Phase I
      • 31億円
      • 1.5年
    • Phase II
      • 69億円
      • 2.5年
    • Phase III
      • 196億円
      • 2.5年
    • Submission (to BLS)
      • 43億円
      • 1.5年

    Survive the Valley of Death and De-risk Your Pipeline, Lonza –

    https://www.lonza.com/custom-manufacturing/development-technologies/protein-and-vaccine-development-services/developability-services/about-developability-assessment.aspx
  • [用語] Atopic Dermatitis

    [用語] Atopic Dermatitis

    Atopic Dermatitis; アトピー性皮膚炎; AD)

  • [Bio-Material] Sartobind® Phenyl [2020/02/05]

    [Bio-Material] Sartobind® Phenyl [2020/02/05]

    Sartobind Pheny

    疎水性クロマト用のメンブラン担体です。レジンを使用するより取り扱いが簡便になり、製造工程がシンプルになります。もちろん、シングルユース仕様です。

    Sartobind® Phenyl

    https://www.sartorius.com/shop/ww/en/usd/sartobind®-phenyl/c/M_Sartobind_Phenyl
  • [Bio-Equip] Xuri Cell Expansion System W25 – △ID8624 [2020/02/05]

    [Bio-Equip] Xuri Cell Expansion System W25 – △ID8624 [2020/02/05]

    Xuri Cell Expansion System W25

    Cytiva社製のロッキング方式の細胞の拡大培養システム

    Xuri Cell Expansion System W25, GE Healthcare –

    https://www.gelifesciences.co.jp/catalog/37456.html
  • [Bio-Lab] Empty Column, PD-10/自分で充填するスペシャルなPD-10カラムの使い方 – Rapid Purification – カラム精製システムは不要 – ID8584

    [Bio-Lab] Empty Column, PD-10/自分で充填するスペシャルなPD-10カラムの使い方 – Rapid Purification – カラム精製システムは不要 – ID8584

    安価にカラム精製を行う

    Mr.HARIKIRIからお届けするPD-10 Emptyカラムのスペシャルな使い方を紹介します。

    僕が行うタンパク質精製の検討では、PD-10カラムを必ず使います.Empty columnが無い場合,プレ充填されているPD-10の中身を抜きます.

    短時間でカラム検討を行うために,レジンの充填容量は0.5mL (多くて1mL)にします。吸着と洗浄および溶出の条件を決定するためです.

    大学やもしかすると高校でもできるシンプルな実験設備で可能です.カラムには送液ポンプなどは必要ありません.自然落下の速度で実験を行えます.通常設定されるはずのカラムへのポンプ流速での線速より5倍程度高速になりますが、迅速検討としては、問題ありません.

    PD-10 Empty Column

    PD-10製品には,Emptyとプレ充填品がありますが,プレ充填品は,タンパク質の脱塩に用います.Empty品も同様のレジンをマニュアルで充填すれば,同様に脱塩に使用可能です.僕の場合は,色々なレジンを充填してタンパク質の精製検討に使用します.それは,前述したように,Rapid Purification Methodです.流速は高速です.少量のサンプルでOKです.

    用途

    • プレ充填のPD-10は,一般使用では,精製したタンパク質やラベル標識タンパク質、例えばAlexa標識物のバッファー交換(脱塩)に使用します.
    • はりきりメソッドでは,中身のResinを抜いて、所望するresinを手詰めで充填(0.5mL)しオープンカラムと呼ぶ精製用カラムを作るために使用します.

    PD-10, GE Healthcare

    https://www.gelifesciences.co.jp/catalog/0062.html

    レジンの充填

    1. からのPD-10カラムを準備する
    2. 上下のフィルターの内,ボトムのみ装着する
    3. 適量の水をPD-10カラムのトップから投入して,ボトムフィルターを浸潤させる
    4. PD-10カラムのボトムにキャップを取り付ける
    5. 改めて0.5mLの水を投入してそのカラム側面から見て水面の位置に印をつける
    6. 容積比率50%のレジンの懸濁液を準備する
    7. 水分を取り除いてから、ピペットでレジン懸濁液の1mLを取り,PD-10カラムに投入する
    8. トップフィルターをPD-10カラムのトップに装着する
    9. 直径8mmの適当な試験管(例えばマルエムチューブSS-14)のトップを装着したトップティルターに押し当てて,そのまま押し込んでゆき,レジンをパッキングする.
    10. 50%レジン懸濁液が正確に調製できていれば,0.5mLの時のカラム高となっており,全操作で付けた印の位置にレジンが充填されている.
    11. 以上で,所望のレジンが充填されたスペシャルPD-10カラムの作成が完了する.
    12. カラムは,レジンに対して適切な保存剤で冷蔵保存して,検討実験まで保管する.
    13. 僕の場合は,3M NaCl溶液をPD-10カラムが受けれる容量いっぱいを投入し,自然落下させて,カラムの側面から残り2mL程度になったときに,トップキャップを取り付けて密閉し,最後にボトムキャップを取り付け保管するようにしている.
    14. スペシャルPD-10カラムを使用する前には,僕の場合,どんなレジンでも,6M 塩酸グアニジン水溶液の6カラムボリューム(6CV)で洗浄し,その後,6CVの10mM NaOHで洗浄します.その後,平衡化バッファの適量で平衡化します.あとは,実験のカラム手順に従って精製条件検討を実施します.
    15. 精製条件検討については,以下の方法に従います.
    16. ロードサンプルをロードします.自然落下でロードしていきます.カラムのボトムから出で来るポストロードされたサンプルは,3mL~15mLの遠心管などで分取回収します.
    17. 洗浄・溶出するための準備したバッファは,6CVでそれぞれ投入して,同よょうに遠心管にて分取回収します.
    18. 得られたサンプルは分析に供与します.
    19. 分析は,一般的には,SDS-PAGE分析,A280や260のUV測定,ELISAなどによる特異的分析などがあります.当然,目的のタンパク質に対する特異的な測定方法の確立がなされている必要があります.
    20. まずは,SDS-PAGEによる全タンパク質と目的タンパク質の純度について分岐せすることが可能です.目的タンパク質の特異的分析方法により定量化することも必要です.

    編集履歴

    2020/02/04, Mr. Harikiri
    2022/10/02,追記:レジンの詰め替え方法とスペシャルPD-10カラム,スペシャルPD-10カラムを用いたタンパク質の精製検討方法.
  • [Bio-Equip] Glass Empty Columns [2020/02/04]

    [Bio-Equip] Glass Empty Columns [2020/02/04]

    Empty Glass Column

    クリニカル(臨床)用のタンパク質生成に使用するカラム

    Empty Columns – Cytiva –

    https://www.gelifesciences.com/en/us/shop/chromatography/columns/empty-columns-for-lab-scale